上海沪宇生物科技有限公司
2011/10/24 9:10:00基本试剂:
1.*抗体;
2.生物素化第二抗体;
3.辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。
实验方法:
1.将固定后的标本用PBS漂洗;
2.于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过氧化物酶;
3.TBS漂洗3次,每次1min;
4.在室温下用二抗的正常血清孵育20min;
5.滴加一抗后在室温下放置1h或4℃冰箱内过夜;
6.TBS漂洗3次,每次1min;
7.滴加二抗后于室温放置30min;
8.将标本于生物素化的第二抗体在室温孵育10min;
9.TBS冲洗3次,每次1min;
10.再与稀释的LSAB在室温孵育10min;
11.重复步骤9;
12.用DAB或AEC显色;
13.用蒸馏水反复冲洗;
14.用苏木精复染;
15.封片。
原文地址:http://www.seekbio.com/biotech/Immunity/2011/r815534155.html