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生物素法标记链霉卵白素

上海沪宇生物科技有限公司

2011/10/24 9:10:00

基本试剂:

1.*抗体;

2.生物素化第二抗体;

3.辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素。

实验方法:

1.将固定后的标本用PBS漂洗;

2.于室温下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用来密封内源性过氧化物酶;

3.TBS漂洗3次,每次1min;

4.在室温下用二抗的正常血清孵育20min;

5.滴加一抗后在室温下放置1h或4℃冰箱内过夜;

6.TBS漂洗3次,每次1min;

7.滴加二抗后于室温放置30min;

8.将标本于生物素化的第二抗体在室温孵育10min;

9.TBS冲洗3次,每次1min;

10.再与稀释的LSAB在室温孵育10min;

11.重复步骤9;

12.用DAB或AEC显色;

13.用蒸馏水反复冲洗;

14.用苏木精复染;

15.封片。

原文地址:http://www.seekbio.com/biotech/Immunity/2011/r815534155.html

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