HPLC色谱柱是设计用于为 HPLC 和 UHPLC 应用提供可靠且可重现结果的色谱柱。产品在多种相中操作，有多种固定相和色谱柱尺寸可供选择。包括分析、防护、阱和制备色谱柱。
色谱柱的柱效是非常重要的指标，一般都取决于固定相的性能和装柱技术。一般HPLC的色谱柱固定相(填料)大致有三种：硅胶或以硅胶为基质质的填料、聚合物填料和无机物填料。正相色谱柱大多采用硅胶类填料，反相色谱柱则多采用以硅胶为基质组成的官能团类的填料。以聚合物为填料的色谱柱最大的特点是pH在1～14都能用；疏水性强。但无机填料色谱柱一般只是限于特殊用途，比较少用。
因为HPLC的样品都为溶液，而溶液受温度影响很大。例如：温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的柱效、流动相的黏度都会产生影响；如果温度升高，可能会提高溶液在流动相中的溶解度，可以降低分配系数K；降低流动相黏度可以降低柱压，有利于保护色谱柱，延长色谱柱的寿命。但是，温度不能太高，否则会产生气泡。
HPLC工作者还必须注意不同的温度，对色谱柱的保留时间、分离效果会有影响；对检测器的灵敏度也会有影响。特别是对示差折光器的灵敏度、最小检出限的影响很大。所以，很多HPLC特别注意对恒温系统的设计。这些都是HPLC设计者、使用者应该重视的问题。
