色谱柱是HPLC分离过程的核心,对于糖类的分析来说,不同的色谱柱直接决定分离的对象、过程和效果。糖类色谱柱的基本分离原理是体积排阻色谱,除此之外,还有分配色谱的原理和离子相互作用,比如配位交换,样品与抗衡离子互相作用,使得在精细结构上不同的各种单糖得以分离。
糖类色谱柱的特点:
1、对糖和有机酸同时分析色谱柱。
2、中性糖用尺寸排阻法分离,有机酸用离子排阻法分离。
3、适用于糖醛酸和醛糖酸的分析。
使用注意事项:
1、一般情况下缓冲液浓度为0.005~0.02mol/L即可。
2、流动相在使用前一定要通过0.5μm以下的滤膜过滤。
3、不推荐使用甲醇作为流动相。
4、如果柱子使用过缓冲液或酸后,就不能再使用乙腈/水为流动相。因此使用缓冲液或酸后,建议今后一直将此柱作为缓冲液专用柱,不建议使用此柱再做其他分析。
5、在pH中性附近使用时保留会增强。