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2023/11/5 9:33:30孔雀石绿,分子式为C23H25ClN2,是人工合成的有机化合物,是一种有毒的三苯甲烷类化学物,既是染料,也是杀真菌、杀细菌、杀寄生虫的药物,长期超量使用可致癌,无公害水产养殖领域国家明令禁止添加。 2019年12月27日,孔雀石绿被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单。
孔雀石绿进入水生动物体内后,会快速代谢成脂溶性的无色孔雀石绿。孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸、致突变的作用,其在养殖业中的使用未得到美国食品与药物管理局(FDA )的认可;根据欧盟法案2002/675/EC的规定,动物源性食品中孔雀石绿和无色孔雀石绿残留总量限制为2μg/kg;日本的肯定列表也明确规定在进口水产品中不得检出孔雀石绿残留;我国在农业行业标准《NY5071- 2002无公害食品鱼药使用准则》中也将孔雀石绿列为禁用药物。由于没有低廉有效的替代品,孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不止。
深圳艾瑞斯生产的孔雀石绿胶体金快速检测卡应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测水产品组织样本中孔雀石绿残留。样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的孔雀石绿与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上孔雀石绿偶联物结合。当样本溶液中的孔雀石绿含量大于检测限时,检测线T不显色或显色明显比C线浅,结果为阳性;当样本溶液中孔雀石绿含量小于检测限时检测线T显紫红色(T线与C线一致或更深),结果为阴性。
样本前处理:
1、取切碎的一定量的去脂肪水产品组织样品,用均质机均质;
2、取约4 g 均质物于50 mL 离心管中;
3、依次加入0.5 mL提取剂1和1 mL提取剂2,再加入4 mL乙腈,拧紧管盖剧烈振荡混匀2分钟;
4、室温下(20-25℃) 4000 转/分钟离心5 分钟;
5、吸取1 mL 上清液于10 mL离心管中,加入100 μl氧化剂,60℃下氮气或空气吹干,得固体残渣;
6、向吹干的离心管中加入0.3 mL MG复溶液,用吸管反复吸打管内液体以冲洗及溶解管壁上的待测物质,作为待检样品溶液。
样品检测:
1、撕开铝箔袋,取出检测卡,水平放置桌面上;
2、用滴管吸取待检样品溶液,垂直滴加4滴(约120 μL)到金标微孔中,再用滴管将微孔中的红色物质和待检溶液充分混匀,静置2 min,吸取全部液体滴加到检测卡的加样孔中(S处);
3、加样后开始计时,室温下放置8-10分钟判断结果,超过10分钟的结果只能作为参考。
结果判断:
阴性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)显色比C线深或者一样深,说明样品中待检物质浓度低于检测限或无待检物残留。
阳性:对照线(C)出现紫红色线,检测线(T)不显色或T线显色明显比C线浅,说明样品中待测物浓度高于检测限。T线明显显示为绿色的,可判为阳性。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
注意事项:
1 、过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
2 、检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
3 、不要触摸检测卡中央的白色膜面。
4 、取液滴管不可混用,以免交叉污染。
5 、待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染,否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象,从而影响实验结果的判定。