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2023/12/6 9:37:35BUNSEN资讯| 牛血清的介绍和概述
牛血清是动物血清中的一种,是细胞培养中重要的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,也是一种常用的生物化学试剂,有着广泛的应用。由于牛本身是大型动物,在研究上具有操作便捷性,收获效率高等优点,故牛血清行业应用非常普遍。
牛血清常分为胎牛血清,新生牛血清,小牛血清,成牛血清。
牛血清通常含有一定比例的蛋白质、糖类、矿物质和维生素;而成牛血清常被用作酸碱调节剂、细胞稳定性外源调节剂和促进修复和重组等。
【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。
【新生牛血清】(Newborn Calf Serum,简称NBCS):0—7天内(也有说法是0—30天内);
【小牛血清】(Calf Serum):采自出生30天至1年的小牛。
【成牛血清】(Adult Bovine Serum,简称ABS):采自成年牛收全血后分离得到血清。
怎样筛选合适的胎牛血清是细胞培养中一个非常关键的步骤,首先,将产品测定其pH值,非常重要,要保持在7.4至7.6的pH范围内;接下来,要检查有效成分, 检查其中的细胞因子、培养基添加剂和免疫抑制因子的质量水平;最后,细胞存活率的测定也很重要,由于内毒素直接参与细胞凋亡,对细胞培养结果影响较大,且不同批次的血清,内毒素差异又不易控制,牛血清的质量越高,细胞的生存率和能力也越高,可以替代部分试剂中添加的有机物。
内毒素含量越低,级别越高,以胎牛血清为例:
血清中内毒素含量≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;
血清中内毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;
血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;
胎牛血清在细胞培养中的作用:
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
7.参与细胞冻存。
在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(最常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定相应浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质
储存条件:-20°C冻存。
胎牛血清解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。
若置于4°C的血清,应在一周内用完,用量频率少推荐使用EvaCell免分装50ml的规格哦
血清和培养基的配制,应遵循“现用现配”原则,保证更好的细胞培养效果。配好的培养液,应于一周内用完。
血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中有效活性成分和被污染,影响血清品质。
血清融化注意:
在水浴过程中,血清的平面要浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身,使血清混匀,但摇动中尽量不要产生泡沫!
胎牛血清使用说明:血清从-20℃取出后,融化,按推荐体积加入到基础培养基中,混匀,制备成新鲜培养基(整个操作需在无菌超净台中进行,注意无菌操作)。配制好的培养基推荐在4℃保存,应在1周内用完。
关于热灭活:胎牛血清不推荐热灭活。
热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。
在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。
并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。
若针对某些特殊试验,对于胎牛血清一定要做热灭活,国际上推荐热灭活的方法:40℃水浴,20min。
BUNSEN本生胎牛血清优势:
1 全球有的血清来源,批次稳定
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