*，制药领域中许多生物分析化合物都是碱性的，可以通过疏水性或阳离子交换吸附剂轻易地提取。不过，降脂他汀类和抗炎药却大多是酸性的。使用传统的疏水性方法无法提取这些酸性化学物。因此，安捷伦开发出一种命名为Bond Elut Plexa PAX的新型聚合物强阴离子交换填料，专门用于简化该提取过程。
图 1. 使用安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 从血浆中提取酸性药物。（放大 图片）
我们开发了一种简单通用的方法，使用安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性化合物。为了评估该方法的性能，我们测定了吸附剂床的分析物回收率、提取样品响应的线性以及加标血浆样品分析的准确性和度。
由于方法的验证过程非常耗时并且需要准确度*的数据，因此只有速度快、回收率好、重现性高的固相萃取（SPE）方法才能令人满意。如果能对 SPE 过程进行优化且不损害数据完整性，便能够简化和缩短方法的验证过程。Bond Elut Plexa 系列采用通用的方法，zui大程度缩减方法开发过程，同时还提高了分析灵敏度和重现性。
我们使用安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 96 孔板和2% NH4OH 、5% 甲酸进行提取。图 1 显示了提取流程。将所有样品蒸干，接着使用5 mM 80:20 的甲酸铵: CH3OH 水溶液定容至 100 µL。然后在安捷伦 325-MS LC/MS（采用 vESI 离子源）仪器上进行液相色谱/质谱分析。
我们通过测定分析物响应并将其与加标流动相标准品进行比较来计算回收率。由于提取效率低、离子抑制效应或未洗脱导致的分析物损耗均会体现在回收率上。尽管一些回收率在 50% 至 60% 的范围内，但响应是线性的，因为方法的曲线线性良好，准确性高。所有药物的回收率均高于 50%，且重现性良好，相对标准偏差（RSD）低于 7%（表 1）。
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| 表 1.安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性药物的回收率。 | 图 2.安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 提取酸性药物的回收线性良好。 （放大 图片） | 图 3. 安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 从人体血浆中提取的 50 ng/mL 样品的色谱分析结果。（放大 图片） |
从 0.5 到 200 ng/mL 的线性良好（图 2）.选择 50 ng/mL 的中点浓度测定校正曲线的准确度 （表 2）. zui后， 图 3 显示的样品色谱结果展示了该方法有效性。
药物 | 0.5 ng/mL | 50 ng/mL | ||
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准确度 （%） | % RSD （n=8） | 准确度 （%） | % RSD （n=8） | |
| 阿托伐他汀 | 90 | 11 | 106 | 11 |
| 双氯芬酸 | 116 | 14 | 109 | 6 |
| 速尿 | 99 | 14 | 95 | 9 |
| 酮基布洛芬 | 104 | 13 | 108 | 4 |
| 普伐他汀 | 108 | 9 | 96 | 8 |
表 2. 校正曲线的准确度。
上述结果表明，安捷伦 Bond Elut Plexa PAX 使用此简便方法提取酸性化合物异常简单。更好的是，该吸附剂对所有化合物都能提供较高的回收率，人体血浆中 0.5 至 200 ng/mL 的药物样品能够获得良好的线性。此外，校正曲线也呈线性，一阶线性回归的相关系数均大于 0.995。对于所有化合物而言，该方法准确性高，重现性好，大多数结果都在实际值的 ±10% 以内，RSD 低于 15%。
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