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脂质体转染试剂的配方

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2023/12/13 21:03:09

脂质体和非脂质体转染试剂是常用的基因递送技术,它们能把DNA、siRNA、mRNA等分子送到真核细胞中,用于各种研究和药物开发。今天我们来谈谈脂质体转染试剂的配方

脂质体转染试剂主要由脂质体、DNA、缓冲液和稳定剂组成。脂质体是一种包裹DNA的物质,能把它送进细胞。它的配方包括正电荷脂质、中性脂质、胆固醇和PEG。缓冲液负责调整pH值和离子强度,有助于提高转染效率。稳定剂则保护所有这些东西,防止在制备过程中降解。

常见的一种脂质体转染试剂配方如下:

* 1,2-二棕榈酸-3-辛酰基-甘油(DOTAP)50μg + 胆固醇10μg + 磷酸二氢钠2.5μg + 氯化钠150mM + 无菌水10ml。

制作方法:

1. 把DOTAP和胆固醇溶于氯仿中,制成脂质体溶液。

2. 把缓冲液的无菌水和氯化钠溶液混合。

3. 把脂质体溶液和DNA混合,再加入缓冲液中,轻轻搅匀。

4. 静置15-30分钟,让脂质体和DNA充分结合。

5. 将混合物滴入细胞培养皿,进行转染。

不同的细胞系和DNA片段可能需要不同的转染试剂配方和条件。所以在开始实验前,最好先优化转染试剂的配方和条件。

总的来说,了解脂质体转染试剂的配方和制备方法对更好地开展研究十分有帮助。

本期内容:脂质体转染试剂的配方

下期内容:脂质体转染试剂与非脂质体转染试剂的区别

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