表面微生物污染的检查需要使用接触器或拭子,获得某表面某时间点的微生物数量。
接触器以容器内已知面积的固态培养介质与表面接触,接触面积应大于20cm2,均匀用力将整个营养介质压住表面几秒钟,不得移动。然后将装置放回容器内,再清洁采样表面,清除残留营养物。接触器培养后显现的菌落可以给出原表面微生物的存活状况的镜像“图”。
使用拭子更为简单和灵活,用拭子擦拭某个表面,它抹去的微生物数量就可以计算出了。对接触装置触及不到的、不平或有凹陷的非吸收性大表面,用拭子采样特别方便。棉拭子的操作方法如下:
准备材料:自制无菌棉拭子或购买商品化的无菌棉拭子、内径10cm×10cm无菌规格板、无菌生理盐水、培养基平皿。
如果取样物体是平面的,将无菌规格板放在物体表面,用浸湿的无菌棉拭子在无菌规格板空心处横竖涂抹均匀,涂抹时随之转动棉拭子,剪去棉拭子与手接触部分,将棉拭子放入装有一定体积的无菌生理盐水中待检。
将采样管敲打80次以上是棉拭子上的细菌充分扩散,做适当稀释,进行平板计数,37℃培养48h计数。
细菌总数(CFU/cm2)=(平皿上菌落平均数×稀释倍数)/采样面积(cm2)