透析的原理和过程

一、透析的原理

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

二、透析的过程

1）把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。（例如，在1L透析液中透析10ml的样品）

2）裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度（约占总样品体积量的20%）作为头部空间。

3）把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹3-5mm的位置再夹住。不要折叠透析袋。

4）由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹。

5）把透析样品放在合适的透析缓冲液中。

6）透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行3次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4小时，6-8小时和10-14小时（第二天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后，要至少继续进行2小时的透析。

注意：对于高浓度污染物，样品可能需要较长的时间透析，透析液需要更频繁的更换。

7）透析温度主要取决于样品。温度最高限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃。再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。