CellartisiPS细胞向血管内皮细胞定向分化的培养要求及方法如下:
培养基准备:
血清基础培养基:使用高质量的无血清iPSC培养基作为基础培养基。
定向分化因子添加物:添加特定的生长因子和信号通路激动剂,如BMP4、ActivinA、bFGF等。
iPSC预处理:
扩增iPSC:将iPSC在6孔板上进行扩增至适当数量,并确保其处于良好的生长状态。
预处理细胞:在预处理之前,应将iPSC从无血清培养条件中转移到有血清或低浓度因素(例如ActivinA)的培养条件中。
向血管内皮细胞定向分化:
洗涤和收获:将预处理的iPSC用PBS洗涤后,加入含有特定分化因子和激动剂的新鲜补给液。
分化过程控制:根据具体方案,在不同时间点以不同方式对细胞进行诱导。可能需要调整各种因素,如浓度、时间和顺序等。
收获细胞:根据所需的分化程度和时间,收获相应的血管内皮细胞。
血管内皮细胞培养:
培养基转换:将收获的血管内皮细胞转移到血管内皮细胞特定的培养基中。常用的培养基包括EndothelialCellGrowthMedium(EGM)。
经常更换培养基:每隔2-3天更换一次新鲜的培养基,以保持适宜的营养供应和环境条件。
贴壁培养:将血管内皮细胞接种在贴壁组织培养器皿上,如6孔板或96孔板,并确保其附着并扩增。
请注意,在进行任何实验操作之前,请参考Cellartis提供的详细实验方案和技术资料,并按照相关安全规范操作。