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微流控毛细管电泳答疑小课堂

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2024/1/25 18:39:11

Revvity的明星产品LabChip GXII Touch 毛细管电泳系统采用一个单吸管微流体芯片,可快速对96或384孔板中的蛋白质样品进行指征分析。微流体芯片技术可全自动的完成蛋白质样品的染色、脱色、电泳分离和分析。Labchip仪器的光学元件检测到激光诱导的荧光信号后,易于操作的系统软件自动分析数据,并通过Ladder和内标校正为用户提供蛋白质相对浓度、分子大小和纯度等。可立即生成虚拟胶图、电泳峰图或汇总表格式的电子数据结果以供用户查阅或报告(如图1)。




图1. LabChip GXII Touch 软件的图形化用户界面

常见问题

Q

Low marker的作用是什么?

A

用于校正、对齐。比如跑400个样品,出峰时间会有差异,必须用Low marker校正。

Q

为什么有的样品比Ladder跑得慢?

A

因为试剂中的Ladder是没有经过任何糖基化等修饰的,若样品是经过修饰的,分子量就偏大,会跑得稍慢,基于原理,这一点在任何CE技术中都一样,无法避免。


Q

蛋白芯片与核酸芯片有什么不同?

A

蛋白芯片有脱色步骤,因为蛋白变性后,样品中有大量的SDS,需要去掉没有与蛋白结合的SDS,否则背景值会很高。另外蛋白芯片不需要wash,而核酸芯片需要wash,因为蛋白芯片使用较快,能检测的样本只有400/200,经过测试发现不wash,对性能没有影响。(此处Wash指实验结束后芯片加Storage Buffer后放在设备上wash。)


Q

机器Purge的功能有什么作用?

A

Purge是施加3 min的正压来疏通管路,防止冷凝水等堵塞管路。


Q

机器是否需要每天关机?

A

若做不到每天关机,至少需要2-3天重启一下机器。


Q

上一个样品run完到下一个样品会有一个wash的过程,这一步是否能够wash干净?

A

可以一针样品一针水去测试,实际测试结果是上一个样品不会对下一个样品产生干扰。


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