Caspase活性检测相关问题解答
1：Caspase活性测试是如何使用的？www.runwelltac.com
答：Caspase活性测试为在细胞裂解液中检测蛋白酶活性提供了简捷方便的手段。当对专一Caspase的多肽底物被裂解时，释放出的指示分子可用普通读光仪或荧光读板仪来做定量测定。将从细胞凋亡样本得到的信号同未经诱导的对照样本进行比较，可以确定Caspase活性增加的倍数，而Caspase酶活性是同检测到的信号直接成正比。
答：R&D Systems的Caspase活性测定试剂盒可作为半定量测试。检测结果用于测量在细胞凋亡细胞中与未经诱导细胞中的Caspase活性倍数的增加。实验时，采用本底对照(无细胞裂解液或无底物的反应)。如果本底对照也有一定的读数，这一读数应当在记算倍数增加之前从试验数据中差减。
答：Caspase活性检测用于测定不同Caspase的蛋白酶的活性，表达为比未诱导样本的倍数增加。Caspase ELISA试剂盒用于测定不同Caspase在样本中的含量，以pg /mL定量表达。
4：caspase X 活性测试是对caspase X专一的吗？
答：大多数caspase会裂解所有的底物，它们根据Michaelis-Menton动力学趋于选择某一底物而非另一底物，但没有任何底物是对某一Caspase专一的。比如，Caspase 3和Caspase 7都可裂解DEVD底物；Caspase 9、4、5 都可裂解LEHD。R&D Systems为每一Caspase选择了它所适宜的底物。如果反应进行的太久，一些Caspase会激活另一些Caspase。
答：所有的Caspase活性检测试剂盒中的细胞裂解液都是一样的。所以，可用它裂解细胞，和用于多种Caspase活性的测试。
6：R&D Systems的Caspase抑制剂是否可逆？
答：所有R&D Systems的Caspase抑制剂在N端有苯甲氧碳基(Z-)和FMK功能组，它们可穿孔细胞，是不可逆转的。
答：R&D Systems提供多种重组Caspase酶，它们是理想的阳性对照。如果试验者自己想建立一阳性对照，有许多可以产生细胞凋亡的阳性对照的方法都已发表。如果将细胞同2 mM星形孢菌素(Staurosporin)温育2小时，可诱导绝大多数细胞类型进入细胞凋亡。R&D Systems有文献资料列举了对Caspase如何产生阳性对照，可向我们的技术服务索取。
