茶氨酸(Theanine)是茶叶的特征氨基酸,也是茶叶呈味物质之一,茶叶存在二十多种氨基酸中,茶氨酸约占茶叶氨基酸总量50%~60%,在鲜叶中茶氨酸含量约占茶叶干重的1~2%。研究表明茶氨酸具有抗氧化、调节免疫、延缓衰老等多种生物活性。
某用户制得两种茶叶样本,希望索莱宝代检其中茶氨酸的含量,作为评价样本优劣的指标之一。
茶叶中茶氨酸经沸水加热提取,净化处理后,用高效液相色谱仪进行测定,用标准品进行定性和定量。
由于样本处理与检测方法无需开发,该样本收到后次日即得检测结果,报告于次日发予客户。
3.1.样品信息
收到茶叶样品两个,a和b。
3.2.材料与方法
所有的溶剂与试剂均为色谱级,茶氨酸标准品选用的是索莱宝产品(ST8430 L-茶氨酸)。
3.3.样品制备
茶氨酸提取方法
(1)茶叶样品经磨碎混匀后,称取1.0g(准确至0.01g)试样;
(2)加沸蒸馏水,置于100℃的恒温水浴锅中浸提30min;
(3)0.45μm水相滤膜过滤,作为代测液备用;
本实验所用的仪器为高效液相色谱仪,配备紫外检测器,色谱柱为C18 (250*4.6mm 5μm ),流动相A:纯水,流动相B:乙腈,洗脱梯度如下:
茶氨酸标准溶液:
分别将1mg/ml的茶氨酸储备溶液稀释为对应浓度的茶氨酸标准使用液。0.45μm水相滤膜过滤。
待流速和柱温稳定后,进行空白运行,准确吸取一定量茶氨酸标准使用液注射入HPLC,在相同的液相色谱条件下注射同等量测试液,测试液以峰面积定量,由色谱峰的峰面积可以从标准曲线上求出相应的茶氨酸的浓度,测试液中的茶氨酸的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。
X—样品中茶氨酸的含量,单位为克每千克(g/kg)
c—样品浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL)
V—最后总定容后样品的体积,单位为毫升(mL)
m—样品的质量,单位为克(g)
w—样品的干物质含量(质量分数)%
综上,可计算出a.b两个茶叶样本中,茶氨酸的具体含量。
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索莱宝基于自身搭建分析检测平台,提供的高效液相色谱技术服务,可以快速、准确的进行物质的定性、定量分析。先进的仪器设备、专业的技术团队、严格的执行标准,保障实验方案的科学性、稳定性、重复性。
服务项目主要包括:
1) HPLC方法学开发和验证
2) 物质含量的测定
3) 中药指纹图谱研究
4) 药物(天然产物/原料药及其杂质)
分离纯化
5) 物质结构确定
6) LC/LC-MS/NMR检测