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茶多酚（TP）检测试剂盒（福林酚微板法）

产品货号：BA1572

产品规格：100T

产品简介：

茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，是一类儿茶素为主体的黄酮化合物，儿茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化物质，能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锶90和钴60迅速排出体外。

尚宝茶多酚(TP)检测试剂盒(福林酚微板法)参考国家标准GB/T 8313而来，其检测原理是利用福林酚氧化茶多酚中的酚羟基-OH，使其显蓝色，用分光光度计或酶标仪测定765nm处吸光度，在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比，与标准曲线比较，进而计算出茶多酚的含量。该试剂盒主要用于测定植物组织样品中茶多酚含量，尤其适用于茶叶。本产品仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成

自备材料：

1. 茶叶、绿茶等待测样本

2. 蒸馏水、甲醇

3. 研钵、200目细胞筛

4. 水浴锅或电炉

5. 离心机、离心管或试管

6. 96孔板、酶标仪

操作步骤 (仅供参考) ：

1. 准备样品：

①固体样品：称取1g植物样品，充分研磨成粉末，称取0.2g加入10ml离心管中，再向其中加入在70℃水浴中预热的70%甲醇水溶液5ml，盖紧并使样品湿润，立即放入70℃水浴中浸提10min（每隔5min晃动一次），浸提后冷却至室温，3500r/min离心10min，转移上清液至10ml容量瓶。向样品残渣再加入5ml 70%甲醇水溶液浸提一次，重复上述操作。合并上清液并定容至10ml，摇匀，即为茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的检测。

②绿茶、血浆、血清和尿液等液体样品：绿茶样品可直接用本试剂盒测定。血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。

2. 配制系列茶多酚标准：用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml)，按下表进行操作，依次稀释。

3. 配制福林酚工作液：按照福林酚试剂：蒸馏水=1:9的比例，现配现用，不宜长期保存。

4. TP加样：取96孔板，按照下表设置空白孔、对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的TP浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置2平行孔，求平均值。

5. TP测定：以空白孔调零，酶标仪测定765nm处各标准孔、测定孔的吸光度。

计算：

以系列茶多酚标准浓度(1~6号)(2、5、10、30、50、80μg/ml)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中TP含量。

固体样品TP含量(μg/g)= (C×V_T×N)/W

式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T =提取液的总体积(ml) =10ml

W=固体样品的质量(g) =0.2g

N=提取液的稀释倍数

液体样本TP含量(μg/ml)= C×N

式中：C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

N=提取液的稀释倍数

注意事项 ：

1. 茶多酚提取液宜4℃避光保存，且保存时间在24h以内。

2. 福林酚有一定的腐蚀性，请小心操作。

3. 样品中茶多酚浓度过高，颜色反应将特别深，超出仪器的检测范围，应用蒸馏水适当稀释重新检测。

4. 该试剂盒测定标准品时，肉眼可见，浓度小于10μg/ml时，呈浅蓝色，30~50μg/ml时，呈蓝色，大于80μg/ml时，呈深蓝色。

附录： 参考标准曲线范围：尚宝测定茶多酚标准在5、10、30、50、80、100μg/ml时的吸光度，据此作出其参考标准曲线如下：

注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有波动，该值仅供参考。

有效期：6个月有效。4℃运输，4℃保存。