显微镜物镜的技术指标
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王琼
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数值孔径zui大值为1.4,这个数值在理论上和技术上都达到了极限。目前,有用折射率高的溴萘作介质,溴萘的折射率为1.66,所以NA 值可大于1.4。
数值孔径是显微镜物镜的重要参数,决定了物镜的分辨率。与物镜的放大倍数,工作距离,景深有直接关系。
一般来说,它与分辨率成正比,与放大率成正比,焦深与数值孔径的平方成反比,NA值增大,视场宽度与工作距离都会相应的变小。
数值孔径与分辨率成正比,但这并不是说在选择物镜的时候一定要选择数值孔径(NA)zui大才是,因为物镜还会有很多其他重要参数,比如荧光透过率、工作距离等等,根据自己的实验选择。
焦深
焦深也叫景深,其定义是:指使用显微镜观察和拍摄样品表面时,从对准焦点的位置开始,改变物镜与样品表面的距离时,对焦能够保持清晰的范围。肉眼的调整能力因人而异,所以焦深也会出现因人而异的情况。现在常用的是与实验结果比较一致的Berek 公式。
齐焦距离
齐焦距离是指,对准焦点时的物镜镜体定位面到物体表面的距离。OLYMPUS UIS2/UIS光学系统物镜的齐焦距离为45 mm,ZEISS ICCS光学体统、LEICA HC光学系统的齐焦距离也是45mm,NIKON CFI 60 光学系统的齐焦距离是60mm。
工作距离
工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。
镜检时,被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。因此,它与焦距是两个概念,平时习惯所说的调焦,实际上是调节工作距离。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。