1. 体重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 异氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5% 异氟醚维持麻醉。在颈部中线切开一个切口。
2. 分离右侧的颈总动脉和迷走神经。右侧的颈总动脉暂时结扎。
3. 分离右侧的颈外动脉和颈内动脉，右侧的颈内动脉暂时结扎；右侧的颈外动脉头端结扎，近心端挂线备用。
4. 随后，用无菌的1ml注射器针头在右侧颈外动脉上做一个小洞，然后插入线栓，近心端挂线适度的系牢插入右侧颈外动脉的线栓，以防止血从小洞中流出；松开右侧颈内动脉暂时的结扎线，轻轻送入线栓到大脑中动脉，当感觉到阻力时停止，系牢线栓。缝合皮肤。
5. 60min后，线栓轻轻从大脑中动脉移出，系牢颈外动脉结扎线；然后松开右侧颈总动脉暂时的结扎线，小鼠进行再灌注。
6. 48h后神经功能评分，Garcia评分。
