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产品名称：琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

产品货号：TD407- 10 (10 次反应)

     TD407-50 (50 次反应)

     TD407-200 (200 次反应)

产品亮点：

• 从琼脂糖凝胶中快速（15分钟）高产量地回收超纯的DNA.

• 微量柱设计使得DNA可以在高浓度下洗脱到最小体积（≥10 µl）.

• 洗脱的DNA非常适合用于DNA连接、测序、标记、PCR等应用。

产品组分：

产品特性：

DNA纯度-洗脱到的高质量、纯化的 DNA 尤其适用于 DNA 测序, DNA 连接, 内切酶消化,基因芯片；

DNA大小-50 bp 到 23 kb 之间；

DNA回收率-一般的，可在 10 µl 的水中洗脱出 5 µg 的 DNA 。对于从 50bp 到10kb 的DNA，回收率为 70%-90% ，对于从 11kb 到 23kb 的 DNA ，回收率为 50-70%；

样品来源-来自 PCR， 限制性内切酶消化， 质粒抽提， 激酶反应，等的DNA和在TAE 或TBE缓冲的琼脂糖凝胶切片中的 DNA。

缓冲液制备：

DNA在使用之前一定要配好，添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记！！！

10次反应的DNA洗涤液应按照标签上的提示添加100%的乙醇；

50次反应的DNA应添加24ml 100%的乙醇(26 ml 95%的乙醇)到6ml的DNA中；

100次反应的DNA应添加48ml 100%的乙醇(52 ml 95%的乙醇)到12ml的DNA中；

200次反应的DNA应添加96ml 100%的乙醇(104 ml 95%的乙醇)到24ml的DNA中。

实验流程：

以下离心操作步骤的离心力均在 10,000 - 16,000 x g 之间进行。

1. 使用刀片或手术刀把 DNA 片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内. 注意: 从凝胶上切下的琼脂糖尽可能的要少.

2. 将 3 倍体积的ADB溶胶液 添加到每 1 体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中. 例如: 对于 100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块 ， 添 加 300 µl 的 ADB 缓冲液 .

3. 在 37-55 ℃下温水浴 10 分钟直到凝胶切块溶解. 注意: 确定凝胶切块解是很重要的步骤. 在温水浴过程中可辅以温和的搅拌有助于凝胶的溶解。如果DNA 大小超过 8kb ，加热之后需要额外添加等量胶块体积的水。例如： 100 µl (mg) 的琼脂糖凝胶切块，添加 300 µl 的 ADB 缓冲液.加热之后添加 100µl 的水。

4. 将溶解的琼脂糖切块溶液放到 1号C 中并把柱套在收集管里.

5. 离心 1 分钟后. 倒掉过滤液. 注意: 柱所能容纳的样品体积为 800 µl. 所以, 如果样品体积超过 800 µl 时， 柱就要被多次填充和离心。

6. 添加 200µl 的 DNA洗涤液 到柱中离心 1 分钟， 去除滤出液.

7. 重复第 6 步洗涤步骤.

8. 可选步骤： 将收集管中的废液倒掉，并将 1号C 套回 收集管 中额外离心2 分钟，尽量除去洗涤液，以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。

8. 直接添加 10 µl DNA洗脱液 到柱基质中. 将柱套在 1.5 ml 离心管中离心1 分钟来洗脱DNA.

注意: 从柱中洗脱出的 DNA 产量与 pH 和温度有关. 如果使用水来洗脱， 确保 pH 是 >6.0. 在向柱中加入水后静置 1 分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA 的产量.在 60-70 oC 的水中洗脱 DNA 可增加较大DNA (> 10 kb)的产量。

注意: 如果试验需要的话 TE 缓冲液 (10mMTris-HCl ， 1mM EDTA ， pH8.0) 或改进的 TE(10mM Tris-HCl ， 0.1mMEDTA ， pH8.5) 也可用来洗脱.

得到的超纯 DNA 可进行后续试验了！

欢迎订购：

天津益元利康生物科技有限公司现货供应简石生物琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒（TD407），欢迎选购！