人前列腺癌细胞DU 145复苏方法
慧颖生物热卖细胞：
人源 人肾透明细胞腺癌细胞786-O 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人源 人肝细胞HL-7702[L-02] 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人源 人胃癌细胞MKN-45 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁和少量悬浮生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人源 人急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat 1×10⁶cells T25培养瓶 RPMI1640培养基；15%胎牛血清；1%双抗 悬浮生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人源 人前列腺癌细胞DU 145 1×10⁶cells T25培养瓶 MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人源 人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH 1×10⁶cells T25培养瓶 MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 贴壁生长 提供STR鉴定报告 37 常温
人前列腺癌细胞DU 145复苏方法
1、提前打开水裕锅，加热到37度，从液氮 罐中取出需要复苏的细胞；
2、放水裕锅快速解冻(中途不要随意拿出冻 存管直到冻存管中的液体全部融化)准备细 胞专用培养基和无菌离心管培养基需提前预 热
3、用完培稀释冻存管中的细胞悬液至离心 管中收集细胞至元南离心管，800-1100 rp/5min，取出离心管，管底可见细胞沉淀
4、去除上清，用5ml完培重悬离心管中的 细胞液至T25瓶中，十字摇晃均匀；放入培 养箱，隔天观察
传代
1、准备所需耗材紫外消毒30分钟，观察细胞密度 80%即可传代； 2、去掉旧培养基，加入3mIPBS缓冲液轻轻润洗后去 除，加入1ml胰酶，均匀覆盖细胞表面(胰酶需提前预 热)； 3、细胞消化至变圆，轻拍瓶身滑落.加入4ml完培终 止消化，收集消化下来的细胞至无菌离心管， 800-1100 rpm/5min 4、取出离心管，管底可见细胞沉淀，准备两个T25瓶 ,各加入2.5ml培养基； 5、离心管内去上清，用5ml完培重细胞悬液，分装至 2个T25瓶，十字摇晃均匀放入培养箱，隔天观察；
特殊细胞收到注意事项
部分细胞由于贴壁不牢在运输过程中发生细胞脱落，这是正常现象正确处理后都可以正常生长。 1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞（1200rpm3-5min）去除旧培养基； 2、用PBS重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心（1200rpm3-5min）去除PBS； 3、加入1ml左右0.25%胰酶重悬细胞，混匀即可，不能吹打太多次，放入培养箱消化，根据细胞特性决定消化时间（约1~2分钟） 4、消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml培养基混匀以终止消化，离心 （1200rpm3-5min） 去除胰酶； 5、加入5ml左右的细胞相应的培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶/皿中； 6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞，若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化，使之贴壁后待细胞生长稳 定后再消散细胞。
