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ELISA试剂盒检测原理

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2024/5/15 7:43:40

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被活性氧抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。

 实验原理
酶联免疫吸附实验(ELIAS)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等有点。

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。马上进行实验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NAN3的样品,因NAN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


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