二氧化碳培养箱，又称细胞培养箱，喆图二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成类似细胞/组织在生物体内的生长环境，要求稳定的温度37℃、稳定的CO2水平5%、较高的相对饱和湿度（95%）来对细胞/组织进行体外培养的一种仪器。二氧化碳培养箱是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必需的关键设备，广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养，常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精（IVF）、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。
一、实验目的
利用二氧化碳培养箱模拟哺乳动物细胞生存的环境，通过收集培养箱内的细胞分泌物，研究细胞在特定条件下的分泌功能，为进一步的功能研究和应用提供实验依据。
二、实验原理
哺乳动物细胞在生长和繁殖过程中，会分泌各种生物活性物质，如生长因子、激素、酶等。二氧化碳培养箱可以提供细胞生长所需的气体环境（95%空气和5%二氧化碳），维持培养基的pH值，有利于细胞的生长和分泌功能的维持。
三、实验材料与仪器
1. 材料：哺乳动物细胞系、二氧化碳培养箱、培养基、试剂、仪器等。
2. 仪器：二氧化碳培养箱、细胞培养板、离心机、移液器、吸头、培养皿、显微镜等。
四、实验步骤
1. 将哺乳动物细胞系接种到细胞培养板中，放入二氧化碳培养箱中，培养至细胞生长至适合阶段。
2. 为了研究细胞在不同条件下的分泌物变化，我们可以设置不同的实验组，如改变培养基成分、调整二氧化碳浓度等。
3. 将细胞培养板放回二氧化碳培养箱中，继续培养。期间注意观察细胞的生长状态，适时更换培养基。
4. 培养至所需时间后，取出细胞培养板，收集培养箱内的细胞分泌物。
5. 采用离心方法分离细胞分泌物，收集上清液，分装并标记，置于-80℃冰箱保存备用。
6. 实验结束后，清洗细胞培养板，并进行消毒处理，放回二氧化碳培养箱中备用。
五、注意事项
1. 在操作过程中，避免二氧化碳培养箱内的气体环境受到污染，确保无菌操作。
2. 定期检查二氧化碳培养箱的运行状态，确保其正常工作。
3. 观察细胞的生长状态，适时更换培养基，保持培养基的新鲜度。
4. 收集细胞分泌物时，注意避免扰动细胞，以免影响分泌物的收集。
5. 分离细胞分泌物后，及时将上清液分装并标记，置于-80℃冰箱保存，避免反复冻融。
6. 实验结束后，及时清洗和消毒细胞培养板，确保实验设备的正常使用。
六、实验结果与分析
通过二氧化碳培养箱培养哺乳动物细胞，并收集细胞分泌物，可以获得富含生物活性物质的样本。将这些样本进行后续的实验研究，如分析分泌物的成分、功能等，可以为细胞生物学研究、药物研发等领域提供有价值的实验数据。
在这个实验中，我们可以探索细胞在不同条件下的分泌物变化，进一步了解细胞的行为和功能。同时，二氧化碳培养箱的使用为我们提供了一个稳定和可控的实验环境，使我们的实验结果更加可靠和准确。
