胎牛血清是一种常用的细胞培养添加剂，它提供细胞生长必需的营养物质、生长因子和附着因子。为了确保FBS的长期保存和使用效果，正确的冻存和复苏操作至关重要。以下是关于胎牛血清冻存和复苏的详细描述：
1. 胎牛血清的接收与检查：
- 在接收新的FBS时，应检查外包装是否完好无损，以确保无菌条件。
- 确认血清的生产日期、有效期和批次号，以便追溯和质量控制。
2. 冻存前的准备工作：
- 在冻存前，FBS应存放在2-8°C的冰箱中，避免反复冻融，因为这会影响血清中的蛋白质和其他成分的稳定性。
- 准备适量的无菌冻存管或瓶子，并确保它们的密封性能良好。
3. 分装与标记：
- 根据使用需求，将FBS分装到准备好的冻存管中，避免一次性解冻大量血清，以减少反复冻融对血清质量的影响。
- 在每个冻存管上清晰标记血清的批次号、分装日期和有效期，以便使用时能够追溯。
4. 冻存方法：
- 将分装好的FBS放入-20°C冰箱中预冻数小时，然后转移到-80°C超低温冰箱或液氮罐中长期保存。
- 确保冻存过程中温度的逐渐降低，避免快速冷冻导致的血清成分变性。
5. 复苏(解冻)步骤：
- 在使用FBS前，将其从冻存环境中取出，并在2-8°C的冰箱中缓慢解冻，通常需要过夜。
- 避免在室温下长时间放置，以防细菌污染和血清成分的变化。
- 也可以将冻存管置于37°C水浴中快速解冻，但需注意防止水浴的污染。
6 使用与再冻存
- 解冻后的FBS应在解冻当天使用，以保证其生物活性和营养成分的完整性。
- 如果一次未使用完，可以将剩余的FBS重新冻存，但应注意避免反复冻融，因为这会降低血清的质量。
7. 注意事项：
- 在整个冻存和复苏过程中，应严格遵守无菌操作规程，以防止微生物污染。
- 使用无菌的移液工具和容器，避免交叉污染。
- 定期检查冻存设备的温度记录，确保冻存环境稳定。
8质量控制：
- 在使用新批次的FBS之前，建议进行小规模的细胞培养试验，以评估血清的质量和适用性。
- 记录每次冻存和复苏的详细信息，包括日期、时间和使用情况，以便在出现问题时进行追溯。
