传统的转染技术无法有效转染许多常用于细胞疗法的细胞类型，如原代T细胞。而电穿孔是一种强大的转染工具，它利用电脉冲瞬时增加细胞膜的通透性，使裸物质（如DNA/RNA、蛋白质等）短时大量进入细胞完成载体递送，以更低成本、更灵活高效和更安全可持续的优势，成为非病毒载体转染中前景的新兴技术之一。
然而你真的了解电穿孔技术吗
RegMedNet所推出的电穿孔工具书中邀请到了Arsenal Biosciences的联合创始人Theodore Roth和Lonza细胞工程研发主管Ludger Altrogge，重点回答了六道精华问题。
Theodore Roth
Arsenal Biosciences
联合创始人
Ludger Altrogge
Lonza细胞工程研发主管
Interview
超越障碍：
关于非病毒转染的访谈
Q1
Ludger, 电穿孔等非病毒方法在基因修饰方面的优势在哪里？
非病毒方法在使用的货物/底物类型方面具有灵活性。例如，它不能只传递核酸(DNA、mRNA)，也不能传递蛋白质，如用于CRISPR基因编辑的Cas9 RNPs。非病毒方法既适用于治疗基因的瞬时表达，也适用于细胞的稳定遗传工程。前者可以通过通过传递mRNA或DNA（质粒、而转座酶系统（如睡美人或 PiggyBac）以及用于定向整合的工程化核酸酶（如CRISPR）可实现稳定的细胞基因工程。基于病毒和转座酶的改造通常更有效，但由于整合在基因组中随机发生，因此可控性较差。将工程化的核酸酶作为重组的RNPs运送，可以更好地控制修饰的剂量。
Q2
Theo，你是如何在实验室中使用电穿孔技术的？
Q3
Ludger，你能详细介绍一下龙沙提供的非病毒基因转移技术吗？
Q4
Theo，在你看来，使用Nucleofector™技术进行CRISPR/Cas9介导的基因组编辑有哪些优势？
Q5
Theo，你们也进行 CRISPR 筛选吗？
Q6
Theo，您认为核转染技术在治疗方法和药物开发中的应用前景如何？
除此之外，更有以下内容免费分享给大家。
Review：对间充质干细胞进行改造以增强骨靶向性和骨再生能力
Poster：诱导性Cas9 T细胞：异体CAR-T细胞生成的创新平台
Research article：用于体内应用的人CD34+祖细胞的高效瞬时基因标记
Poster：原代人类肝细胞的高效转染和长期持续功能性
Review：CRISPR介导的DNA甲基化模式修饰在癌症治疗新时代的应用
Benchmark：通过流式细胞术和桑格测序评估CRISPR/Cas9介导的CD19基因敲除GM24385细胞的方案
