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ACT-1 (人甲状腺癌细胞)培养步骤

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2024/6/26 16:20:09

ACT-1 (人甲状腺癌细胞)培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

           1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。

           2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

           3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

二.细胞处理:

           1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入

           37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移

           入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合

           均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,

           加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入

           含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液

           并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,

           即可进行传代培养。对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

           方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


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