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肿瘤的免疫主要是T细胞来执行的，T细胞是我们体内进化的最高等，也是最多样的一类细胞。T细胞的多样性由于TCR的丰富多样，本质上由V(D)J重组导致，T细胞受体识别靶细胞表面特异性抗原，一个抗原就对应着一个T细胞克隆，可达10¹⁵-10¹⁸种，每个克隆都具有特殊的TCR。通过正选择和负选择的进一步筛选，最终形成大约10⁶到10¹⁰种的循环T细胞克隆。其中大概一般可能有几万种到几十万种。是可以识别肿瘤抗原的，叫肿瘤抗原特性T细胞。

TCR结构示意图

肿瘤抗原特异性T细胞检测之前必须要了解一下肿瘤免疫循环理论，它涉及到我们的样本来源。根据肿瘤免疫循环理论，癌细胞释放肿瘤抗原。肿瘤抗原被抗原递呈细胞吞噬之后，抗原递呈细胞就会归巢，回流到我们的引流淋巴结，在引流淋巴结内，抗原被抗原递呈细胞吞噬处理之后就会激活。可以被肿瘤抗原的肿瘤抗原特性T细胞识别，这个肿瘤抗原特性T细胞一旦被激活成熟之后。就会进入血液循环，从而去寻找它的杀伤目标。当它循环到肿瘤组织中，发现肿瘤组织中有对应的肿瘤抗原，就会浸润到肿瘤组织内去杀死肿瘤细胞，这叫肿瘤免疫循环。所以我们机体内有三个位置是有肿瘤抗原性T细胞的，引流淋巴结、外流血和肿瘤组织。

癌症-免疫周期

肿瘤抗原特性T细胞理论上来说分为三大类，一类可以识别肿瘤肿瘤抗原，可以杀死这个被识别的含有肿瘤抗原的肿瘤细胞，这类我们叫做效应性肿瘤抗原T细胞，第二大类就是调节型肿瘤抗原T细胞，这类细胞可以识别肿瘤抗原，但是对癌细胞没有杀伤功能，反而因为它会抑制T effect，从而间接促进癌细胞的生长。第三大类是无能型T细胞，它可以识别肿瘤，抗原，也可以识别癌细胞，但识别癌细胞之后，不具有杀伤功能。

肿瘤抗原特性T细胞，是我们机体内去特异性识别和杀伤癌细胞的最主要的细胞。肿瘤细胞跟正常的细菌和病毒最大的区别就是具有高度异质性，没有占主导地位的抗原，很难找到共有通用占主导地位抗原，这也是开发肿瘤疫苗最大的一个难点，89年研究者发现了一类可以特异性识别某些肿瘤抗原的T细胞，但目前为止种类不是很多。

肿瘤抗性特性T细胞检测的应用和检测意义有哪些呢？

1）癌症免疫治疗药物研究（PD1抗体、双特异性抗体等）：经过药物治疗后是否增加了肿瘤抗原特异性T细胞的数量和总含量；

2）新药物研发、联合用药等（该治疗方法，尤其是化疗是否影响了机体内抗原特异性T细胞的总含量）；

3）溶瘤病毒研究等（溶瘤病毒杀死癌细胞后是否增加了机体内肿瘤抗原特异性T细胞的含量）；

4）癌症疫苗研发（新抗原疫苗、mRNA疫苗、DC疫苗等是否诱导了足够的肿瘤抗原特异性T细胞）；

5）癌症纳米治疗药物研发（很多纳米药物或者免疫调节剂通过诱发ICD效应发挥作用，如果诱导产生了ICD效应，应该能增加肿瘤抗原特异性T细胞的总含量）；

6）放射治疗：对肿瘤组织不同剂量的放射量（是否能够通过放射治疗诱导机体产生更多的肿瘤抗原特异性T细胞）；

7）光热治疗：通过光敏剂、热敏剂等杀死癌细胞后，癌细胞释放的抗原是否诱导产生了更多的肿瘤抗原特异性T细胞。

目前市面上主流的肿瘤抗原特异性T细胞检测技术是1996年，美国斯坦福大学John D. Altman博士等人开发出的MHC-抗原肽复合物四聚体（简称：MHC 四聚体）技术。由于TCR与MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低，半衰期短，相互结合后容易快速脱落，重组的可溶性MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原特异性的T细胞检测。

该技术由4个MHC-抗原肽单体分子及荧光染料组成的复合物，它以带有信号标记的链霉亲合素为基础，交联四个MHC分子单体，形成MHC四聚体；与其他应用于T细胞检测的传统方法相比，如酶联免疫斑点检测(ELISPOT)、单细胞PCR等，MHC四聚体分析技术具有：

1）特异性高；

2）稳定性好；

3）多样化/个性化：可定制，合成特异的抗原多肽片段，组合成各种 T 细胞选择性MHC四聚体；

4）定性/定量分析的优势

MHC-抗原肽复合物四聚体技术

但是MHC四聚体和ELISPOT技术存在一些局限：

1）可以使用的抗原肽数量非常有限，因而只能检测几种特定克隆的抗原特异性T细胞；

2）可以检测到的抗原特异性T细胞种类有限，含量偏低；

3）所使用的抗原肽可能在检测机体内没有相应的抗原特异性T细胞；

4）检测的可能不是占主导地位的抗原特异性T细胞和含量最多的抗原特异性T细胞；

5）检测的抗原特异性T细胞不全面、不准确；

6）价格昂贵；

7）四聚体技术只能检测结构上可以识别相应多肽的T细胞，但是是否有杀伤功能无法确认，因而不能进行功能确认。

Absin肿瘤抗原特异性T细胞含量检测刺激试剂盒

本产品检测纳米颗粒负载癌细胞的全细胞抗原，抗原种类全面、多样和广谱，可全面准确检测不同组织中的肿瘤抗原特异性T细胞。具有特异性高，准确性高，所检测肿瘤抗原特异性T细胞种类全面等优点。测试的结果显示使用负载B16F10肿瘤组织全细胞抗原的纳米粒与小鼠脾细胞单细胞悬液共孵育激活肿瘤抗原特异性T细胞后，在CD3+T细胞中可以表达IFN-γ的T细胞比例比负载8种B16F10的新抗原多肽的纳米粒、以及游离的B16F10肿瘤组织裂解液要多，也更全面。

Absin肿瘤抗原特异性T细胞含量检测刺激试剂盒测试结果快问快答：

1）该试剂盒中的纳米粒是否会作为刺激物，刺激样本产生新的种类的肿瘤抗原特异性T细胞？

不会，肿瘤免疫循环一般只有在体内才会完成

2）不使用二次激活物（多肽或者试剂盒中的纳米粒）是否可以直接检测样本中的肿瘤抗原特异性T细胞？

不行，或者效果很差，样本不经过二次激活所检测的肿瘤抗原特异性T细胞非常少或没有。

3）能否直接用肿瘤组织裂解液作为二次激活物？

效果不好，从我们的验证数据中可以得到答案。

4）我想要检测的肿瘤类型或者物种没有怎么办？

爱必信提供定制服务，除肿瘤外，各种传染病病原也可进行磁珠包被，但需要客户提供抗原，详情可点击肿瘤/传染病抗原特异性T细胞含量检测刺激物定制查看。

5）每种肿瘤都有不修饰、OVA修饰和fluc修饰三种盒子，该如何选择？

与构建肿瘤模型时是否修饰有关，建议相匹配。

6）小鼠样本建议是用什么组织样本进行测试？

优先推荐使用脾脏，血液中含量较少，可能需要多个小鼠血液混合才能达到数量要求。

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