在细胞培养过程中，支原体污染是一个常见且棘手的问题。支原体是一种介于细菌和病毒之间的原核生物，形态多样，没有细胞壁，且能够直接穿过常规的除菌滤膜，因此极易造成细胞培养污染。支原体污染不仅会影响细胞的正常生长和代谢，还可能改变细胞的基因表达，干扰实验结果，甚至导致实验失败。
一般情况下，细胞感染支原体，我们建议直接丢弃并对环境进行消毒处理，但总有一些特殊情况，导致我们不能丢弃辛苦培养的细胞，这时就可以派细胞用支原体祛除试剂上场了。
1、对于已发生支原体污染的细胞，不愿随意丢弃，希望继续培养时，可选择Zell Shield®细胞支原体祛除试剂（货号：13-0050/13-0150）。
如已转染或大量扩增的细胞等情况，需要对已被支原体污染的细胞进行拯救。使用含有复合抗生素成分的Zell Shield®细胞支原体祛除试剂，可以抑制支原体蛋白和DNA合成，同时对细菌和真菌也有抑制作用。
先使用厂家推荐的“悬浮冲洗法”处理好细胞，再使用加了Zell Shield®细胞支原体祛除试剂的培养基养细胞，按照使用说明进行操作，使用Zell Shield®细胞支原体祛除试剂培养4代后，细胞中的支原体即可祛除。
悬浮冲洗法及试剂使用方法：
（1）消化细胞：将培养瓶或培养皿中的细胞消化下来。
（2）离心：将消化好的细胞寄培养液转移至离心管中，进行常规离心。
（3）清洗细胞：弃上清后，用无菌PBS轻柔吹打清洗细胞。
（4）重复清洗：将PBS和细胞的混合物进行低速离心，弃上清并重复清洗3次.
（5）重新培养：最后一次清洗结束后，弃掉PBS上清液，加入含有Zell Shield®细胞支原体祛除试剂的新鲜培养基进行培养，4代后，细胞中的支原体即可祛除。
2、对于无法长期培养的珍贵样本或病毒收获液，则可以使用德国MB公司的Mynox®珍贵生物样品支原体清除试剂（货号: 10-0200/ 10-0500/ 10-1000）。
该试剂含有「治疗液」和「巩固防护液」。「治疗液」来自枯草杆菌提取物，可特异性地与支原体膜结合，改变支原体膜通透性，从而使支原体在2-3小时内破溃死亡；「巩固防护液」加入培养基，后续培养一个月，细胞将会清除支原体的污染，确切有效。
使用方法：
（1）细胞重新传代时，用含Mynox®珍贵生物样品支原体清除试剂、5%FBS的的培养基替换原有培养基，对细胞进行培养。
（2）孵育培养2-3小时。
（3）对细胞进行换液。
（4）用不含Mynox®的正常培养基（原始培养条件）对细胞进行培养，传代3-4次。
（5）可对细胞进行支原体检测，观察细胞状态。
3、对于可以培养超过一个月的珍贵细胞株，如果需要对其进行祛除支原体的处理，可以使用德国MB公司的Mynox® Gold珍贵细胞株支原体清除试剂（货号：10-0201/ 10-0501/ 10-1001）。
该试剂分为直接杀除+巩固防护两步处理，祛除支原体的同时，可进一步在后续培养中巩固清除效果，防止支原体“卷土重来”。
使用方法：
（1）治疗液与含5%FBS的培养及混合
（2）将混合后的治疗液添加至培养皿中
（3）将接种细胞
（4）培养细胞至80%-90%汇合后，进行传代
（5）传代的同时加入巩固液
重复（4）（5）两次
（6）在无Mynox® Gold的情况下传代
（7）用Venor® Gem支原体检测试剂盒检测
