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NK细胞治疗全解析-工艺篇

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2024/7/8 15:24:33

随着NK细胞治疗热度的持续攀升,其合规生产也越来越受重视,本文重点讲述了几个不同来源NK细胞的工艺开发案例和未来展望:

一、PB-NK/外周血NK:

*滋养细胞共培养

收集健康供体单采血,并从中分离外周血单个核细胞,再用VarioMACS设备去除T细胞后,将其转移到A-350N透气袋中与辐照后的自体PBMC共培养,添加OKT3和IL-2,经14天培养,可以获得高纯度的NK细胞(>98%,CD3−CD16+CD56+),且扩增倍数可达520-860。

*无滋养细胞

此外,也有研究开发了无滋养细胞,符合GMP的NK细胞规模化生产工艺。取代滋养细胞的是可以表达IL-21和41BB配体的膜颗粒。

首先用CliniMACS Prodigy系统去除CD3+T细胞,并通过膜颗粒刺激NK细胞并在Prodigy中初步扩增;然后转移到Xuri波浪生物反应器中通过灌流培养进行规模扩增。

最后,NK细胞通过LOVO设备进行清洗收获,并使用CBS 2101降温仪进行低温保存。该工艺在不到2周的时间内可以使PB-NK细胞扩增1000倍,而且NK细胞在该平台培养40多天之后,可以实现高达10^8倍的扩增效果,同时保持细胞毒性潜能。





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