玻璃层析柱是一种常用的实验室设备,主要用于分离和纯化混合物中的组分。它利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异,通过重力或压力作用实现分离。 一、安装步骤
检查配件:在安装前,先检查包装内是否包含所有必要的配件,如柱子、活塞、密封圈、滤板等。确保所有配件齐全且无损。
清洗柱子:使用适当的溶剂清洗玻璃层析柱的内壁,去除可能存在的杂质和残留物。清洗时应注意保护柱子的内壁,避免划伤。
安装密封圈:将密封圈安装在活塞上,确保其紧密贴合柱子的内壁。密封圈的作用是防止流动相泄漏,确保分离过程的顺利进行。
安装滤板:将滤板安装在柱子的底部,以防止固体颗粒进入柱子。滤板的孔径应根据待分离样品的粒度选择。
组装柱子:将活塞插入柱子,确保活塞与密封圈紧密接触。然后将柱子竖直放置,检查是否有泄漏现象。
二、操作步骤
准备流动相:根据实验要求,准备适量的流动相。流动相的选择应考虑待分离样品的性质和分离目标。
装填固定相:将固定相填充到玻璃层析柱中。装填过程中应保持柱子的竖直,避免固定相的流失。装填完成后,轻轻敲击柱子,使固定相紧密排列。
平衡柱子:使用少量流动相冲洗柱子,使固定相与流动相充分接触,达到平衡状态。平衡时间应根据固定相的性质和流动相的粘度确定。
进样:将待分离样品小心地加入到柱子中。进样量应根据柱子的容量和分离目标确定。进样时应注意避免样品在柱子上产生歧视效应。
洗脱:启动蠕动泵或压缩空气,使流动相通过柱子。在洗脱过程中,应观察柱子的出口,确保流动相顺畅流出。洗脱时间应根据待分离样品的性质和分离目标确定。
收集:当目标组分从柱子中流出时,使用合适的容器收集。收集过程中应注意避免交叉污染。
清洗柱子:分离完成后,使用适当的溶剂清洗柱子,去除残留的样品和流动相。清洗时应避免使用强酸、强碱等腐蚀性溶剂。