技术文章

无动物源,更安全,知禾推出规模化生产重组人纤连蛋白片段

北京知禾新创生物技术有限公司

2024/7/23 13:28:11

纤维连接蛋白,也称纤连蛋白,英文名称fibronectin(英文缩写FN)是一种高分子量糖蛋白,Fibronectin可以分为血浆纤连蛋白(plasma FN)和细胞纤连蛋白(cFN)。在血浆中以可溶性二聚体形式存在,而在细胞表面和细胞外基质中以二聚体或多聚体形式存在。血浆纤连蛋白由肝细胞合成,并以一种非活性、紧密的构象存在于血流中,它是纤维蛋白凝块的一个主要组分。细胞纤连蛋白广泛存在于细胞外基质中,通过与细胞表面整合素等受体相互作用,发挥细胞黏附、迁移和信号转导作用。

重组人纤维连接蛋白 (rhFN)是体外表达的人源性纤维连接蛋白,选取特定的人纤连蛋白功能性片段,表达密码子优化的重组纤连蛋白,从而既可以解决大量生产的问题,同时也降低了成本,与天然FN功能和效应相同。

 

本产品包括细胞结合域(central cell-binding domain,含RGD序列),肝磷脂结合域(heparin-binding domain)和 CS1 位点三个功能区域。它由 574 个氨基酸组成,分子量 63 kDa。

本产品用重组大肠杆菌基因表达生产人粘连蛋白片段,高纯度,高活性,无动物源性污染。

轮播图 粘连蛋白.png


 

重组人纤连蛋白(rhFN)具有以下主要应用:

一、用于细胞培养

rhFN可促进细胞贴壁、细胞黏连生长增殖、维持良好细胞状态。用于体外哺乳动物细胞培养基中,可以增强多种细胞对基质的黏附,提高细胞生长和扩增效率,特别适用于骨髓间充质干细胞、内皮细胞和神经干细胞等的培养。

细胞的黏连是机体结构得以维持、细胞生长完成的必要条件,研究结果表明:rhFN作为细胞培养的基质,可以促进细胞的黏连生长,使多种细胞的贴壁率达到90%以上(对照组为10%),细胞形态结构良好,细胞的代谢率增强,DNA、RNA及蛋白质合成速度提高约5倍,细胞的集落率升高几倍,原代培养的成活率明显提高,细胞生长时间缩短。

同时,rhFN能刺激细胞增殖。作用原理是:rhFN和抗CD3抗体可分别与T淋巴细胞上的VLA和TCR结合,两者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,通过Ras途径刺激T细胞的增殖和分化,使其获得上千倍的增殖。

 

二、提高病毒转染效率

本产品能够大幅地提高逆转录病毒感染哺乳动物细胞的感染效率,其作用原理是:细胞表面 VLA-4 及 VLA-5 可分别与本产品上的 CS-1 位点及细胞结合域结合,逆转录病毒载体可以与肝磷脂结合域结合。

o77o.png



在经本产品包被的培养容器表面,细胞与病毒载体以高浓度共存,从而显著提高病毒的转染效率。

本产品包被在细胞培养皿表面时,显着增强了哺乳动物和昆虫细胞的转染能力。


三、应用于材料表面涂层,促进细胞黏附

纤连蛋白存在于多种动物细胞表面的大分子细胞外膜蛋白,是细胞外基质和基底膜中的主要非胶原性糖蛋白。在细胞黏附中起中心作用,可调节细胞极性、分化和生长。

rhFN用于3D细胞培养技术中制备细胞外基质,为细胞提供更加生理性的微环境,有利于维持干细胞的自我更新和定向分化。用rhFN来包被容器可以增强细胞的附着、生长和分化。与在平坦的2D塑料表面上生长的细胞不同,包被表面上的细胞生长更接近天然环境。

对于贴壁依赖性细胞系,rhFN可作为非动物源性细胞附着和生长的有效基质,用其包被培养容器后,可促进多种细胞的快速附着和良好生长。

将rhFN涂到微球载体上作为细胞大量生产的介质,可以节省空间,节省原材料,成为应用培养细胞技术来生产新药品的基础物质。

还可将rhFN用于医疗器材、移植物和人工生物材料的表面涂布,可以改善其生物相容性,促进体内纤维化和血管再生,减少炎症反应和免疫排斥。

 

四、其它应用

1、rhFN能提高细胞的融合率,缩短融合周期,可应用于许多科研中,如应用于细胞杂交瘤技术等。

2、rhFN具有促进细胞迁移、改变细胞形态和增强细胞化学活动性的能力,可用于3D细胞培养、组织器官构建和创伤修复中诱导细胞走向定向迁移与黏附。

3、rhFN参与细胞外基质的组装与重构,可用于改善细胞外基质的完整性,增强其功能和稳定性。在某些疾病相关的ECM重构障碍中具有潜在治疗作用。

4、rhFN可用于促进内皮细胞迁移与管腔形成,诱导血管发生,还可用于抗凝血、抗感染和改善组织相容性、创面修复与组织再生、血管发生与修复、 肿瘤治疗、肝脏修复与再生等。

 

产品特色:

1.     更安全,无任何动物源污染风险;

2.     更可靠,批间稳定性好;

3.     更稳定,所有生产物料全部国产化,保证供应链稳定;

4.     更优惠,联系我们,欢迎申请试用。


相关产品

猜你喜欢

当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :