HPLC高效液相色谱系统是一种广泛应用于化学、生物学、医药等领域的分析仪器,用于分离、鉴定和定量复杂样品中的化合物。
HPLC高效液相色谱系统组成包括泵、自动进样器、色谱柱和检测器。
1、HPLC泵
使流动相持续通过 HPLC系统。常见的HPLC高效液相色谱仪泵类型有几种:二元 HPG 泵较常用于需要两种溶剂梯度的常规和高通量应用。四元 LPG 泵用于方法开发或者灵活性至关重要的情形,等度泵用于简单的 QA/QC 应用。三元 DGP泵应用于工作流程和自动化解决方案或双系统方法。
2、自动进样器
自动将样本准确、精确地注入仪器中。HPLC高效液相色谱自动进样器的工作原理是抽吸精确体积的样本并将其注入到流动相流中。与手动进样相比,使用自动进样器可减少手动操作并提高进样精度和准确度,这是进行定量HPLC分析必须先考量的的重点。
3、色谱柱
色谱柱装有特定的固定相,可根据特定的物理化学特性分离各化合物。较常见的HPLC色谱柱由不锈钢制成,填充有通常经修饰的多孔硅胶颗粒,例如,C18键合是反相 HPLC的常见选择。然而,有多种多样的HPLC色谱柱硬件和填充材料。
4、检测器
对从色谱柱分离和洗脱的目标化合物进行鉴定或定量分析。从色谱柱洗脱后,流动相将分离的条带或分析物运送到检测器 – 最终的HPLC组件。虽然有很多 HPLC检测方法,但是没有一种方法可以检测所有可能的分析物。液相色谱工作人员可以在同一次运行中使用两种或更多种HPLC检测方法来更深入地表征样本。HPLC 检测器的种类繁多。常用HPLC检测器种类有紫外-可见光、荧光、质谱、电雾式、蒸发光散射和折射率检测器,这些不同种类的HPLC检测器有着不同的特点。