基因扩增仪的工作原理基于PCR技术,该技术模拟了细胞内的DNA复制过程,在体外人为创造核酸半保留复制条件,使目的DNA在细胞外完成扩增。PCR反应一般设置20~40次循环,每一循环包括高温变性、低温退火、适温延伸三步反应。每一循环的产物作为下一个循环的模板,从而实现DNA片段的指数级扩增。
基因扩增仪根据功能和结构的不同,主要分为以下几种类型:
普通基因扩增仪:一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的基因扩增仪,主要用于简单的、对目的基因退火温度已知的扩增实验。
梯度基因扩增仪:可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度),用于研究未知DNA退火温度的扩增,能够一次性筛选出表达量高的适合退火温度,提高PCR科研效率。
实时荧光定量基因扩增仪:在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,能够实时采集扩增过程中的荧光信号,并输出量化的实时结果,广泛应用于定量PCR实验。
原位基因扩增仪:用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,适用于细胞生物学和病理学等领域的研究。