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细胞实验的常见问题

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2024/8/11 14:47:24
  细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞系。细胞复苏是细胞培养的重要环节,下面让我们一起来看看细胞实验的常见问题都有哪些吧!
 
  1.如何选用细胞系培养基?
 
  优先根据细胞来源公司提供的培养条件,其次参考ATCC推荐细胞对应培养基。一般建议不要随意更换培养基种类。细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基,若骤然使用与原先提供的培养条件不同的培养基,可能造成细胞形态发生变化或无法存活,以及细胞的表型功能丢失。
 
  2.为何培养基用一段时间后,颜色偏紫?
 
  培养基随着多次开盖会使培养液CO2 逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性从而变紫,尤其是剩余的培养基越少越容易变紫。可将培养瓶瓶盖旋松放入二氧化碳培养箱校正溶液PH值,过一段时间就会变回正常。变紫的培养基是可以继续使用的,培养细胞时在培养箱会自动恢复颜色。
 
  3.细胞培养液变黄变浑,如何处理?
 
  细胞培养液变黄多半是细胞密度过大,细胞增殖速度过快,产生大量酸性代谢废物,导致细胞营养不足。而培养液变浑多半是发生了细菌污染。出现这种情况应立即进行消化传代处理。
 
  4.血清中出现的沉淀是什么,有影响吗?
 
  ①纤维蛋白,是经常出现的较大沉淀物,可达到1-2mm,用肉眼可观察到;
 
  ②胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,是血清出现沉淀物的常见原因;
 
  ③磷酸钙,也是一种常见沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养时会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。
 
  5.细胞何时换液最佳?
 
  ①细胞消化传代后,建议隔天或隔两天换一次液;
 
  ②细胞传代后,发现碎片多、死细胞多,在细胞形态已经形成的前提下可第二天换液;
 
  ③对于生长速度较慢的细胞,可多放点培养基,减少换液次数,让细胞静养;
 
  ④细胞传代后,细胞分布不均、细胞堆叠、细胞间隙大、局部密度大,这些情况下不用换液,可采取消化重铺的方式。
 
  7.细胞支原体污染如何处理?
 
  支原体污染是比较难去除的,特别容易复发,一般建议直接更换新的细胞,如特别精贵或重要的细胞可尝试使用四环素、大环内酯类抗生素(泰乐霉素)、喹诺酮类抗生素。
 
  更多有关细胞实验的常见问题,请联系天津益元利康生物科技有限公司!

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