“唯快不破” SCIEX 7500+系统实现高覆盖靶向脂质组学分析

在2024年美国质谱会（ASMS）会议上，生命科学分析技术领域的创新者SCIEX推出了SCIEX 7500+系统，这是SCIEX定量产品组合中的新款质谱仪，延续了定量可靠灵敏的传统。该系统为科学家提供了灵敏度与耐用性的双重保障。新的应用文章表明7500+系统因为超快的采集速度和灵敏度，能够显著提高高覆盖靶向脂质组学分析的定量准确度、稳定性和对于脂质同分异构体的色谱分辨率1。

展示了SCIEX 7500+系统下进行约2000MRM离子对的高覆盖脂质扫描的功能和能力。

脂质分析是一个具有挑战性的分析过程。首先脂质数量众多，约有大于>150,000个脂质；其次生物体内不同脂质含量差异大，含量跨度可达10-12个数量级；脂质结构复杂多样，且目前标准品不全。质谱法由于其灵敏度高、特异性强、定量范围宽等技术优势，是目前用于脂质分析的主流技术。

SCIEX新推出的7500+三重四极杆质谱，提高了离子传输效率，实现采集速度的大幅度提升；同时兼具高灵敏度、快速极性切换和定量线性范围宽等优势。在此技术上，开发了可以定性和定量约2000种脂质分子的高覆盖靶向脂质组学分析方法。方法使用HILIC色谱进行分离，可有效减小脂质共流出，避免共流出组分的相互影响。扫描速度的提升不仅可以带来更多的扫描点数从而提升定量的准确度和稳定性，并且得到更好的峰形状，提高了脂质异构体分辨率。

色谱使用Phenomenex Luna™ NH2 (100 x 2.1 mm, 2.6 µm)色谱柱. 流动相A为二氯甲烷和乙腈（7/93, v/v），流动相B为二氯甲烷和乙腈（50/50, v/v，含2mM乙酸铵）。

质谱基于多反应监测(MRM)扫描模式高覆盖靶向脂质组学分析方法，使用 scheduled MRM (sMRM) 模式正负离子同时扫描，检测1925种脂质，其中正离子模式下822种，负离子模式下1103种。

不同脂质峰面积的定量的CV统计也表示采集度对于高覆盖靶向组学分析的重要性。上图显示了5种不同脂类的示例分析物峰，计算了5次连续进样峰面积CV值。在不同扫描速度下，以3ms扫描速度分析的各分析物的CV值低。在使用5 ms扫描速度的实验中，分析物峰上收集的数据点较少，导致一些分析物的峰形失真，导致CV值变大。因此，更快的MRM扫描速度提高了准确度和稳定性，全新的7500+系统结合自动化的分析软件提供了更实用高覆盖靶向组学解决方案。

图A为1-和2-lysoPC(18:1)的4个采集速度的XIC。如蓝色所示，在1.2 ms扫描速度下获得的数据显示为异构体的两个不同的峰。随着扫描速度的降低，在两个峰上采集的数据点也随之减少。在5 ms的扫描速度下(绿色)，两个不同的峰不再被色谱分辨，于是丢失了脂质异构体的定量信息。

图B所显示的上一行的XIC上异构体1-lysoPC(16:0)为主要峰,前面的小峰为异构体2-lysoPC(16:0)。在5 ms的扫描速度下，两个异构体之间的分离消失了。lysoPC(18:1)也有类似的情况存在（图B下一行）。在5 ms的扫描速度下，收集的数据点太少，无法确定是否存在异构体。随着扫描速度的提升，采集点数也随之提升，于是异构体得以被分辨。同时结果显示较慢的扫描速度导致分析物CV也显着更高，会产生显著的定量误差。因此使用SCIEX 7500+系统进行快速采集的脂质组学分析提高了脂质异构体的色谱分辨率。

与传统非靶脂质组学方法相比，靶向脂质组学分析脂质使用简便、灵敏度高，并且能够准确地识别和量化脂质，高覆盖的靶向组学分析被越来越多地监测生物样品中的代谢和脂质。以上这些结果表明，SCIEX 7500+系统可以提高方法的准确度、稳定性和脂质异构体分辨率，同时增加脂质测定的覆盖范围，整体提升高覆盖靶向脂质组学数据质量。