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DNS 试剂(NY/T 法)操作说明

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2024/8/15 12:03:35

DNS 试剂(NY/T 法)操作说明


产品简介:

植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质形状,常以糖含量作为重要指标,单糖和某些寡糖(如麦芽糖)含有游离的醛基或酮基,具有还原性,属于还原糖;多糖和蔗糖等属于非还原糖,可以利用多糖能被酸水解为单糖的特性,通过测定水解后的单糖含量对总糖进行测定。

DNS试剂(NY/T法)由氢氧化钠、3,5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、酚等配制而成,DNS浓度为6.3g/L,是植物总糖和还原糖检测(硝基水杨酸法)的成分之一,其检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系,在540nm处测定棕红色物质的吸光度,该吸光度值与还原糖含量呈线性关系,利用比色法和标准曲线测得样品中的还原糖和总糖的含量。DNS试剂也常用淀粉酶、纤维素酶、木聚糖酶等的活性测定。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。 


产品名称:DNS试剂(NY/T法)

产品货号:XF0284

规格:100ml

储存条件:室温,避光

有效期:12个月

用途:农业部标准法DNS试剂。又称3,5-二硝基水杨酸法或简称DNS法,DNS试剂是植物总糖和还原糖检测(硝基水杨酸法)的成分之一,定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。3,5-二硝基水杨酸浓度为6.3g/L。


自备材料:

1、蒸馏水、盐酸溶液、氢氧化钠溶液

2、剪刀、匀浆器或研钵、50ml 离心管、离心机、水浴锅或恒温箱、分光光度计、比色皿


操作步骤(仅供参考):

1、还原糖的提取:

①称取植物样品 0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约 3ml 匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml 蒸馏水冲洗研磨器 2~3 次,洗出液也转移至该容器。

②50℃水浴 30min,并不时搅拌,以便还原糖彻-底浸出。

③将沉淀和浸出液转移至 50ml 离心管,4000g 离心。

④留取上清液,向沉淀中加入 20ml 蒸馏水,混匀,再次 4000g 离心。

⑤留取上清液,将 2 次获得的上清液合并,用蒸馏水定容至 100ml(提取液),混匀,作为还原糖待测液。

2、总糖的水解和提取:

①称取植物样品 0.5~3g,剪碎,加入蒸馏水约 3ml 匀浆,转移至烧杯或三角瓶中,用12ml 蒸馏水冲洗研磨器 2~3 次,洗出液也转移至该容器。

②向容器中加入 10ml 6M 盐酸溶液,搅拌均匀,煮沸,并不时搅拌。

③取 2 滴滴加于载玻片上,滴加 1 滴显色液,检查水解是否完-全,如已经水解完-全则不显示蓝色。

④水解完毕后,冷却至室温,加入 6M 氢氧化钠溶液,使溶液 pH 至7.4 左右,用蒸馏水定容至 100ml,混匀,4000g 离心或过滤,获得上清或滤液。

⑤取上清或滤液 10ml,用蒸馏水定容至 100ml,成稀释 10 倍的总糖水解液(提取液),取 1ml 总糖水解液,测定其还原糖的含量。

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