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答疑小课堂 | 逐典D-萤光素钾盐疑惑解答

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2024/8/16 11:03:37


逐典D-萤光素钾盐优势

1.高纯度(HPLC: ≥99%)

2.优异的生物发光性能

3.高溶解度(>40mg/ml)


D-萤光素钾盐主要应用在哪些方面?

它主要应用于生物医学研究领域。例如在活体动物成像中,通过标记细胞或生物分子,利用其生物发光特性可以追踪细胞的活动、监测疾病的发展等。在基因表达研究中,可作为报告基因的底物,通过检测萤光强度来反映特定基因的表达水平。此外,在药物研发中,可用于评估药物的疗效和毒性等。



在活体动物成像中如何使用 D-萤光素钾盐?

首先,要把表达萤光素酶的细胞或组织植入活体动物体内。之后以合适方式(如注射)将 D-萤光素钾盐引入动物体内。过一定时间后,用特定成像设备(如Revvity小动物活体成像系统)检测萤光素酶催化 D-萤光素钾盐产生的光信号。依据光信号的强度和分布等信息,能推断出标记细胞或组织的位置、数量等状况。


使用 D-萤光素钾盐有哪些安全注意事项?

D-萤光素钾盐通常需在通风良好的实验室环境下进行操作。操作人员要佩戴合适的防护装备,像手套、护目镜之类的,以防直接与之接触。它需妥善保管,规避受潮、受热或者受光照等可能对其稳定性产生影响的因素。并且,要依据相关规定处置废弃物,防止给环境带来污染


如何正确储存 D-萤光素钾盐?

一般建议将D -萤光素钾盐储存在-20℃的环境中。在这样的低温条件下,能够有效减缓其化学活性,降低可能的分解或变质速度。如果没有-20℃的冰箱,也应尽量将其储存在2 - 8℃的冷藏环境中。虽然这个温度不如-20℃理想,但也能在一定程度上延缓其质量变化。比如在短期内(几周内),如果无法立即将其转移到-20℃储存,2 - 8℃冷藏可以作为一个临时的储存方式。


为什么D-萤光素钾盐/钠盐要溶于无Ca²⁺或Mg²⁺的PBS?

1.保护萤光素酶结构与活性:

萤光素酶的活性部位对其周围环境非常敏感。Ca²⁺和Mg²⁺可能会与萤光素酶的某些结构域或氨基酸残基相互作用,影响其正确的空间构象。

2. 防止竞争性抑制:

在生物发光反应中,萤光素酶与D-萤光素钾盐/钠盐的结合及催化反应是高度特异性的。Ca²⁺和Mg²⁺可能会与萤光素酶的活性中心竞争结合D-萤光素钾盐/钠盐,从而干扰正常的催化反应。

3. 维持细胞正常生理状态:

当进行涉及细胞的实验时,细胞外环境中的Ca²⁺和Mg²⁺浓度变化可能会影响细胞的生理状态和功能。

4.确保实验准确性和可重复性:

在生物发光实验中,准确测量萤光强度是关键。如果使用含Ca²⁺或Mg²⁺的PBS溶解D-萤光素钾盐/钠盐,由于Ca²⁺和Mg²⁺可能与底物或其他实验体系中的成分发生未知的反应,会导致实验结果的不稳定和不可靠。


动物对重复注射D-萤光素的反应如何?

一、急性反应

1.局部组织反应:

在重复注射的初期,注射部位可能会出现一些局部的轻微炎症反应。这是因为多次的针刺和药物刺激会对局部组织造成一定的机械性损伤和化学刺激。例如,注射部位周围可能会有轻度的红肿,这是由于局部血管扩张和组织液渗出引起的。

然而,这种局部的炎症反应通常是暂时的且相对较轻,一般不会对动物的整体健康状况产生严重影响。随着时间的推移和身体的自我修复,这些局部的红肿等现象会逐渐减轻和消失。

2. 整体生理反应:

当注射 D-萤光素后,动物体内的生理系统会对其进行代谢和处理。在重复注射时,如果间隔时间较短,动物的代谢系统可能尚未将前一次注射的 D-萤光素代谢清除。

二、中期反应(多次重复注射后数天到数周)

1. 代谢适应:

随着重复注射次数的增加,动物的肝脏和肾脏等主要代谢器官可能会逐渐适应对 D - 萤光素的代谢需求。肝脏中的酶系统可能会出现一定程度的上调,以更高效地代谢和清除 D-萤光素。

2. 免疫反应调节:

动物的免疫系统也可能对重复注射的 D-萤光素产生一定的反应。在正常情况下,免疫系统会识别 D-萤光素为外来物质,但由于其相对较低的免疫原性,通常不会引发强烈的免疫排斥反应。

然而,多次注射可能会导致免疫系统的一些微妙变化。例如,可能会有少量的免疫细胞如巨噬细胞等在注射部位周围有轻度的聚集,但一般不会引起明显的炎症或免疫损伤。免疫系统会逐渐对 D-萤光素产生一定的耐受性,将其视为相对无害的物质进行处理。

三、长期反应(多次重复注射后数月及以上)

1. 潜在的累积效应评估:

从长期来看,如果持续重复注射 D-萤光素,需要关注药物在体内的累积效应。虽然动物的代谢和排泄系统在不断地处理 D-萤光素,但如果注射频率过高或剂量过大,仍可能存在药物在某些组织或器官中缓慢累积的风险。

2. 对动物整体健康和行为的影响:

在长期重复注射 D-萤光素且剂量和频率控制合理的情况下,动物的整体健康状况和行为通常不会受到显著影响。动物仍然能够正常进食、活动和休息,其生长发育和繁殖等生理过程也基本能够正常进行。

【关于逐典】

上海逐典生物科技有限公司,坐落于中国(上海)自由贸易试验区,获得ISO9001质量体系认证,是一家从事重组蛋白研发和销售的高新科技企业。

逐典生物始终秉持以客户为中心的理念,针对重组蛋白的结构设计、纯化工艺及其稳定剂型相关的多项关键技术进行优化。定向蛋白变复性技术,可将大肠杆菌大量表达的变性固体蛋白转变成高活性可溶性蛋白。凭借技术优势,逐典生物新品研发周期短且可控性强,为重组蛋白的高质高效研发提供保障,为企业生产降本增效。

公司自成立以来成功开发百余种高活性细胞因子及多种高活性蛋白酶,覆盖细胞培养、病毒纯化以及质量分析等生物工艺各个环节。可广泛应用于科研、医药生产及IVD(体外诊断试剂)等领域,满足各类用户所需。




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