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全面解读:抗体选择指南,值得珍藏

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2024/8/19 13:30:03


避免同种系物种的一抗选择

- 避免同种系干扰:在进行小鼠样本检测时,应避免使用小鼠或大鼠来源的一抗。

- 原因:防止二抗与样本中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应,导致背景信号过高。

稀有样本种属的抗体选择策略

- 免疫原序列查询:对于市面上难以找到验证过的抗体,如猪、牛等,可以通过查询抗体的免疫原序列,并与待测蛋白进行同源性分析。

- 同源性标准:若同源性超过90%,可以尝试使用,但需注意,这种情况下,厂家通常不提供质保。

- 同源性分析方法:详见下方视频教程。

- 商业机密问题:对于某些品牌,如CST,免疫原序列可能属于商业机密。此时,可以提供自己的蛋白序列,请求厂家专家帮助分析同源性并给出使用建议。


实验方法确认


确认抗体适用性

- 实验方法标注:检查抗体说明书上的实验方法(application),确保包含您计划进行的实验类型。

- WB实验简便性:如果仅进行Western Blot(WB),选择在说明书中标注WB的抗体即可。

- 多实验方法选择:建议选择实验方法多样的抗体,以便未来进行其他类型实验时无需重复购买。

- 免疫组化(IHC)注意事项:若进行IHC,需确认样本类型(如石蜡切片、冰冻切片或细胞)是否已由厂家验证。未经验证的样本类型通常不提供质保。





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