酶标仪即酶联免疫检测仪,酶标仪检测技术是一种高通量微孔板检测技术,操作简便,被广泛应用于生命科学、生物制药、体外诊断、食品安全、环境科学等领域。传统酶标仪是指具备吸收光检测功能的酶联免疫检测仪,随着科学技术发展和市场需求不断丰富,如今酶标仪所具备的检测功能日益丰富,在光吸收检测(Abs)基础上增加了荧光强度(FI)、发光检测(Lum)、荧光偏振(FP)、时间分辨荧光(TRF)、匀相时间分辨荧光(HTRF)等多种检测技术。然而每一种技术都具有的应用价值和局限性,下面将对几个主流技术进行详细介绍。
工作原理与主要结构和光电比色计基本相同,在特定波长下检测被测物的吸光值,称为光吸收检测(Absorbance,Abs)。只做吸收光检测的酶标分析仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计,其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。光源发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光,进入塑料微孔板中的待测标本。
荧光(Fluorescence)是一些原子和分子吸收特定波长的光(激发:Ex),随后短暂发射 (Em) 更长波长的光的特性。激发峰和发射峰之间的距离称为斯托克斯 (Stokes) 位移,该位移取决于荧光基团。荧光利用一个外部光源,在特定波长下激发样品,荧光基团受到适当波长的激发,分子从基态转化成激发态。随着分子回到基态,能量会以热(损失能量)和能量更低、波长更长的光的形式释放。