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细胞爬片的特点、注意事项及操作步骤

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2024/9/9 9:15:02

  细胞爬片的特点、注意事项及操作步骤

  爬片又名细胞爬片,是指让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,免疫组织huaxue,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等。

  特点:

  1.玻片表面经过TC处理,双面均可使用.

  2.γ射线灭菌,保证无菌.

  3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬片上即可培养.

  4.爬片厚度为0.17mm,直径为8mm/14mm/20mm/25mm.分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板

  5.吸附:该玻片表面具有持久的阳离子电荷,可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞,使之粘附在玻片上,进而在玻璃和切片组织之间形成共价键.因此,无需粘黏剂或者蛋白包被,该玻片也能牢固的粘附切片或细胞。


细胞爬片.jpg


  操作注意事项:

  使用细胞爬片时(比如在六孔板中放入爬片,六孔板的孔底面积往往会比爬片面积多出一部分,加细胞悬液时常常就是细胞铺满整个孔底,有时细胞生长边集现象,就是靠近壁边缘密度要高些,这样处于中央玻片上爬的细胞数量就可能相对较少)

  比较好的做法是将玻片放入孔板的孔内后,加细胞悬液时只滴到玻片上,一直滴到液体布满整个玻片又不会溢出玻片边缘(因为液体表面张力作用可以很容易做到这一点。),放在培养箱里,等细胞贴壁后,取出,再滴加培养基布满整个孔底,继续培养,这样玻片上的细胞生长的密度就会很集中。

  保存方式:

  细胞爬片有三层包装,在超净台无菌的状态下打开包装.未用完的爬片按原先包装方式再包装起来即可。

  注:

  该爬片表面带有正电荷,请勿用手触摸,以免使用效果不佳。

  玻片经过γ射线灭菌后,透明玻片颜色会略变为淡茶色,属正常现象。

  操作步骤:

  爬片的准备

  1、在超净台内,使用75%乙醇擦拭外包装铝箔袋

  2、拆开铝箔袋,取出内置器皿后,用尖镊将内置爬片取出放入所用或培养皿内。

  种植细胞

  1、用胰酶消化好细胞,充分吹打,使之成单细胞悬液(注意:这一点很重要,关系到将来爬出来片子的质量)

  2、种植细胞时,根据玻片的大小,先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基,目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起,然后放玻片,防止加细胞悬液时玻片漂起,造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。

  3、根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可

  注意事项

  1、使用细胞爬片时,(比如在6孔板钟放入爬片,6孔板的孔底面积往往比爬片面积多出一部分,加细胞悬液时,常常就是细胞铺满整个孔底,有时,细胞生长边集现象,就是靠近壁边缘细胞密度要高一些,这样处于中央细胞爬片上的细胞数量相对较少),比较好的做法是,将爬片放入孔内后,加细胞悬液时,只滴到爬片上,一直滴到液体布满整个爬片,但又不易溢出爬片边缘,放到培养箱里,等细胞贴壁后,取出,再滴加培养基布满整个孔底,继续培养,这样爬片上的细胞生长的密度就会很集中。

  2、细胞放到爬片上,之后加任何试剂,都应沿培养板板壁少量一点点倒入液体,直到细胞被液体淹没,尽量不要把细胞冲到细胞爬片以外!

  3、爬片表面带有正电荷,请勿用手触摸,以免效果不佳!

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