①观察前的准备
a.显微镜从镜箱内拿出时,要用右手紧握镜臂,左手托住镜座,平稳地将显微镜放置在桌上,离边缘约5cm,不要将直筒显微镜倾斜。
b.调节照明。显微镜不能采用直射阳光,可利用灯光或自然光通过反光镜来调节照明。调节照明的步骤:首先,使用低倍物镜,旋转粗调节器,使物镜和镜台间的距离约为3mm。然后,旋转聚光镜螺旋,使聚光镜与镜台的上表面相距约1mm。最后,调节反光镜,使视野的光照效果很好的(光线较强时,用平面反光镜)。效果不好时,可通过开闭聚光镜上的孔径光阑进一步调节。对于自带光源的显微镜,可通过调节电阻旋钮来调节光照强弱。
c.光轴中心调节。使用带视场光阑的显微镜时,先将光阑缩小,用低倍物镜观察,在视场内可见到视场光阑多边形的物像,如此像不在视场中央,可利用聚光镜外側的两个调节螺杆将其调到中央,然后缓慢地将视场光阑打开,直至视场光阑的多边形物像全与视场边缘内接。
②低倍镜和高倍镜的使用
a.下降镜台(或升高镜筒),将标本片放置在载物台上,用标本夹夹住,并使被观察的标本处在物镜正下方。
b.转动粗调节器,升高镜台(或下降镜筒),使低倍物镜的前端接近载片,用左眼在目镜上观察,并转动粗调节器,使镜台下降(或镜筒上升),至物像出现,然后转动细调节器,使物像清晰。用标本移动器移动标本片,找到合适的物像,并将其移至视野中央进行观察。
c.转动物镜转换器把高倍镜置于镜筒下方。显微镜在设计制造时,都是共焦点的,即低倍镜对焦后,转换高倍镜时一般都能对准焦点,能看到物像,只需转动细调节器便可使物像清晰。找到需观察的部位,并移至视野中央进行观察。
③油镜的使用
a.滴加镜油。转动粗调节器,使镜台下降(或使镜筒上升),在染色标本处滴加1~2滴液体石蜡或香柏油。
b.转换油镜。转动物镜转换器,把油镜置于镜筒下方。
c.调焦。转动粗调节器,使镜台上升(或镜筒下降),让镜头的前端浸入镜油中。操作时要从侧面仔细观察,只能让镜头浸入镜油中紧贴着标本而避免让镜头撞击载玻片,导致玻片和镜头损坏。然后在目镜上进行观察,并缓慢地转动粗调节器使镜台下降(或镜筒上升)至可看到物像时,再转动细调节器使物像清晰。
如果在转动粗调节器使镜台下降(或使镜筒上升)时,油镜已离开油滴,需要重新进行上述调焦操作。不得边用左眼在目镜上观察,边转动粗调节器使镜台上升(或镜筒下降)并使镜头前端浸入油滴中,这样易使镜头撞击载玻片,损坏标本和镜头。
d.调节孔径光阑和视场光阑。把孔径光阑开到最大,使之与油镜的数值孔径相匹配。通过调节视场光阑或照明度控制钮,选择合适的照明。
e.显微镜使用后的处置。转动粗调节器,使镜台下降(或使镜筒上升),取出标本玻片,然后先用擦镜纸擦去油镜上的香柏油,再用擦镜纸沾少量二甲苯(不能用酒精)擦去沾在油镜上的镜油,最后用擦镜纸擦净二甲苯及镜油。用液体石蜡作镜油时,只用擦镜纸即可擦净,不用(或仅用极少量)二甲苯。把镜头转成“八”字形,套上镜罩后放入显微镜箱中。
