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2024/9/18 16:34:36在进行低氧或高氧培养时,确保细胞的存活率和生长效率需要考虑以下几个关键因素:
1. 精确控制气体浓度:使用三气培养箱可以精确控制氧气和二氧化碳的浓度。例如,Thermo Scientific 的 HERAcell 三气培养箱能够提供接近机体内环境的培养条件,专为优化哺乳动物细胞生长设计,能够提供完善的低氧环境,以实现细胞更快、更健康地生长 。
2. 细胞类型和培养阶段:不同的细胞类型对氧气和二氧化碳的浓度有不同的需求。例如,某些细胞在低氧条件下(如1%-5% O2)可能表现出更好的生长和分化,而其他细胞可能需要更高的氧气浓度。在培养的不同阶段,细胞对气体的需求也可能发生变化。
3. 温度和pH值:维持适宜的温度和pH值对细胞存活和生长至关重要。大多数细胞培养需要在36°C至37°C的温度下进行,且pH值通常维持在7.4左右。使用基于CO2-碳酸氢盐的缓冲液缓冲的培养基时,需要使用外源性CO2来维持pH值 。
4. 避免污染:细胞培养过程中要严格无菌操作,避免细菌、真菌或支原体的污染,这些都会对细胞的存活率和生长效率产生负面影响。
5. 营养物质和血清:培养基中的营养物质和血清对细胞的生长和存活至关重要。需要确保培养基中的成分新鲜且未被破坏,且血清的质量良好。
6. 细胞密度和传代:细胞接种的密度和传代的频率也会影响细胞的生长。过高的细胞密度或过于频繁的传代可能导致细胞应激和生长减缓。
7. 监测和调整:定期监测细胞的生长状态和培养条件,及时调整气体浓度、更换培养基和进行必要的操作,以确保细胞的最佳生长环境。
通过上述措施,可以在低氧或高氧培养条件下优化细胞的存活率和生长效率。