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2024/9/23 9:39:37低聚半乳糖(GOS)是一种功能性低聚糖,婴儿体内的双歧杆菌菌群的建立很大程度上依赖于母乳中的GOS成分。因此,GOS被广泛添加到婴幼儿食品中,以促进婴儿的健康发育。根据GB 5009.289-2023,食品中低聚半乳糖的测定方法是高效液相色谱法。
实验原理是:试样中的低聚半乳糖(n为2~7)经水溶液提取、2-氨基苯甲酰胺衍生,用淀粉葡糖苷酶酶解去除麦芽糊精、淀粉干扰后,用高效液相色谱-荧光检测器检测。采集的色谱峰根据用相同试验条件下液相色谱串联质谱法确定的相同聚合度的低聚半乳糖的保留时间定性,采用相对应聚合度和相对分子质量的麦芽糖类聚糖标准物质外标法定量,扣除乳糖、麦芽糖含量后,得出低聚半乳糖含量。
实验涉及标准溶液的配置:
1.标准储备液(10.00mg/mL):分别准确称取100mg(精确至0.1mg)的乳糖、麦芽糖、麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖、麦芽七糖标准品,用水溶解并定容至10mL,混匀。将各标准储备液转移至储液瓶中,于4℃保存,保存期1个月。
2.混合标准中间液(1.000mg/mL):用Miragen电动移液器吸取各标准储备液(10.00mg/mL)1.00mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀。临用现配。
3.混合标准使用液(100.0μg/mL):用Miragen电动移液器吸取混合标准中间液(1.000mg/mL)1.00 mL于10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀。临用现配。
4.混合标准系列工作液:用10mL规格的Miragen,单吸多排模式设置设置3个体积为1.00、2.50、5.00 mL(程序可存储和调用),然后按分液键,将3个体积的混合标准中间液(1.000mg/mL)分别加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀;再用5mL规格的Miragen设置(或调用)3个体积为0.10、1.00、5.00mL,将3个体积的混合标准使用液(100.0μg/mL)分别加入10mL容量瓶中,加水定容至刻度,混匀。混合标准系列工作液的质量浓度分别为1.000、10.00、50.00,100.0、250.0μg/mL和500.0μg/mL。临用现配。
移取液体的一般是量筒和移液管,存在三个缺点:一是敞口操作,对强腐蚀、有毒有害、挥发性的液体,存在安全隐患;二是操作上环节多,需目视确认凹液面,实现精度难以保证;三是效率较低,无法满足日益增加的液体移取的工作需求。
Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动,吸液和排液也更加稳定,还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。Miragen电动移液器可给电机多段信号,从而达到吸液和排液分次数且各段体积可调,可实现单吸多排、多吸单排等效果,程序还可存储和调用,更加可靠、便捷。