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胎牛血清的内毒素来源及其对实验的不良影响

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2024/9/29 20:10:48

在细胞培养领域,胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)作为一种重要的培养基添加剂,被广泛用于支持细胞的生长、分裂和增殖。然而,胎牛血清中可能含有的内毒素(Endotoxin)一直是科研人员关注的重点问题。

 

胎牛血清内毒素的来源

内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁层上的结构,主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。这些细菌在生存状态下并不释放内毒素,但当细菌死亡自溶或粘附在其他细胞上时,内毒素才会释放出来,表现出其毒性。在胎牛血清的生产过程中,尽管会经过严格的筛选和处理,但难免会有少量的革兰氏阴性细菌残留。这些细菌在储存或使用过程中死亡,从而释放出内毒素,污染血清。

内毒素对实验的不良影响

  1. 细胞毒性:内毒素直接参与细胞凋亡过程,对细胞具有显著的毒性作用。血清中内毒素含量越高,对细胞的毒性越大,容易导致细胞提前老化、形态改变甚至死亡。这对于依赖细胞健康的实验结果具有极大的破坏力。

  2. 实验结果偏差:内毒素能够激活免疫细胞,诱导促炎细胞因子的释放,从而干扰细胞的正常生理功能。这不仅会影响细胞的生长和增殖,还会干扰细胞过程如DNA合成和蛋白质表达,导致实验结果不准确或出现偏差。特别是在基因敲除、细胞转染等精细实验中,任何微小的干扰都可能对实验结果产生重大影响。

  3. 实验成本增加:由于内毒素对细胞的毒性作用,使用含有高内毒素的胎牛血清进行实验时,细胞培养效率低下,实验结果不可靠。这迫使研究人员需要反复进行实验以验证数据,从而增加了实验时间和成本。

  4. 安全隐患:未经检疫或品质不佳的胎牛血清可能携带传染性物质,对实验人员的健康构成威胁。在实验过程中,如果操作不当或防护措施不到位,实验人员有可能接触到这些有害物质,引发健康问题。

应对措施

为了减轻内毒素对实验的不良影响,科研人员可以采取选择低内毒素血清的方法:在采购胎牛血清时,应选择经过严格检测和认证的低内毒素产品。国际上规定特级胎牛血清的内毒素应小于10EU/ml,而更高品质的产品如Ausbian特级胎牛血清的内毒素含量可低至3EU/ml甚至更低。

 

综上所述,胎牛血清中的内毒素来源复杂且难以避免,但其对实验的不良影响却不容忽视。科研人员应高度重视内毒素问题,采取有效措施减轻其对实验的影响,确保实验结果的准确性和可靠性。

 


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