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PCR DNA聚合酶都有什么?

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2024/10/9 13:47:31

DNA聚合酶是催化DNARNA为模板合成DNA的一类酶的总称,又称DNA依赖的DNA聚合酶(DNA—dependent DNA polymeraseDNA pol),它是以亲代DNA为模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。此酶是美国科学家Arthur Komberg1957年在大肠杆菌中发现的,被称为DNA聚合酶DNA polymerase Ⅰ,简称polⅠ)以后陆续在其他原核生物及真核生物中找到了多种DNA聚合酶。这些聚合酶的共同特点是:它们都能把脱氧核糖核苷酸(dNTP)连续的加到双链DNA引物链的3'-羟基末端上,催化核苷酸的聚合,形成新的DNA链。

PCR DNA聚合酶都有什么?

PCR DNA聚合酶的种类包括Taq DNA聚合酶、高保真DNA聚合酶、热启动DNA聚合酶、等温扩增DNA聚合酶和链置换DNA聚合酶等。

一、PCR DNA聚合酶

1. Taq DNA聚合酶

特点:Taq DNA聚合酶是从水生栖热菌中分离提取的,具有很高的热稳定性,能够在70℃保持活性,适合标准的PCR反应。它缺乏3’→5’核酸外切酶活性,因此无校正功能,容易产生错配碱基。

应用:用于常规PCR扩增,尤其是当对保真度要求不高时。其扩增产物3’末端带有A尾,可直接用于TA克隆。

2. 高保真DNA聚合酶

特点:这类酶具有3’→5’核酸外切酶活性,能够校正错误插入的核苷酸,显著降低错配率。常见的有PfuKODPhusion等。

应用:适用于需要高保真度的应用场景,如基因克隆、定点突变、测序及SNP分析等。例如,Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase具有很的保真性和扩增效率,适用于复杂模板的高保真扩增。

3. 热启动DNA聚合酶

特点:通过化学修饰或抗体结合,在室温下抑制其活性,直到高温激活。这种酶可减少非特异性扩增,提高PCR反应的特异性和灵敏度。

应用:适用于需要高特异性扩增的实验,如多重PCR、复杂模板的扩增等。例如,Hieff Union Hotstart High Specific Taq DNA Polymerase能够有效防止非特异性扩增,并提高扩增特异性。

4. 等温扩增DNA聚合酶

特点:这类酶具有链置换活性和5’→3’聚合酶活性,能在恒温条件下进行快速、高效、特异性扩增。

应用:适用于等温扩增技术,如LAMPCPARCA等。例如,Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase具有更高的灵敏度、扩增效率和稳定性,且增加了dUTP耐受性,非常适合基于等温扩增技术的应用。

5. 逆转录DNA聚合酶

特点:这类酶以RNA为模板,按5’→3’方向合成互补DNAcDNA),常用于研究基因表达。

应用:用于将RNA转录为DNA,如RT-PCRqRT-PCR等。常用的逆转录酶包括M-MLVAMV

6. 链置换DNA聚合酶

特点:具有强链置换活性,可以在DNA复制过程中取代旧链,常用于等温扩增技术。

应用:适用于基于链置换的等温扩增反应,如LAMP和滚环扩增(RCA)。例如,Bca best聚合酶和phi29 DNA聚合酶在扩增速度、产量和热稳定性方面都有优异的表现。

二、凡知医学DNA聚合酶推荐:

货号

产品名称

规格

FG2104

凡知医学高保真DNA聚合酶

250 units

FG2103

凡知医学热启动Taq Pro DNA聚合酶

100U;500U;2500U

FG2101

凡知医学Taq DNA聚合酶

500U;1KU



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更多有关DNA聚合酶,请联系天津益元利康生物科技有限公司!

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