在ELISA试剂盒中通常有三次加样步聚，即加标本，加酶联络物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质局部浓缩，散布不均，
应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然
凝聚、缩短后即可取得。ELISA试剂盒也可在板孔中参与稀释液，然后在微型轰动器上轰动1分钟以保证混和。通常说来，
在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一星期测定的需低温冰存。
ELISA试剂盒实验中需留心下列的细节：
1. 严格按照规定的时刻和温度进行温育以保证成果。一切试剂都必须在运用前到达室温20-25℃。运用后当即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确能够导致不的成果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔枯燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的色彩，现已变蓝的底物液不能运用。
5. 防止试剂和标本的穿插污染以免形成错误成果。
6. 在储存和温育时防止强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反响试剂不能触摸漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会损坏试剂盒中反响试剂的生物活性。
9. 不能运用过期产品。
10. 假如可能传播疾病，一切的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测设备。
