Gibco培养基是一种广泛应用于细胞培养的高品质基础培养基,它提供了细胞生长所需的多种营养物质,包括氨基酸、维生素、无机盐、葡萄糖等。为了确保细胞培养的成功,正确配制和使用至关重要。 一、配制Gibco培养基
1、准备工作:
确保实验室环境干净整洁,避免微生物污染。
准备好所需的所有试剂和器具。
2、计算所需量:
根据实验需求和细胞类型,计算所需培养基的体积和浓度。
3、称量试剂:
在无菌操作台上,按照计算结果准确称量各种试剂。
4、溶解与混合:
将称量好的试剂依次加入预先加入一定量无菌水的容量瓶中,轻轻摇晃使其充分溶解。
5、定容与过滤:
加入无菌水至容量瓶刻度线,混匀后用滤膜过滤除菌。
6、储存与使用:
将配制好的培养基分装至无菌试管或培养瓶中,标记好日期和成分,置于冰箱保存备用。
二、使用Gibco培养基
1、细胞接种:
在无菌操作台上,将细胞悬液接种至含有适量培养基的培养皿或培养瓶中。
2、培养条件:
根据细胞类型调整培养箱的温度、湿度和气体成分,确保细胞处于较佳生长环境。
3、换液与传代:
定期更换新鲜培养基,去除代谢废物;当细胞密度达到一定程度时,进行传代培养。
4、观察记录:
密切观察细胞生长状况,记录细胞形态、数量及培养基颜色变化等信息。
三、注意事项
1、避免污染:
整个配制和使用过程中要严格遵守无菌操作规程,防止微生物污染。
2、注意有效期:
使用前检查培养基的有效期,过期培养基不宜使用。
3、兼容性测试:
对于特殊细胞系,建议先进行培养基兼容性测试,以确保细胞能够正常生长。