天狼星红和快绿是一种用于区分胶原蛋白与其周围物质的染料组合。天狼星红专门绑定[Gly-X-Y]原纤维胶原的螺旋结构，无论胶原类型或种类如何，而Fast Green与非胶原结合蛋白质。通过利用这两种染料的d特特征，Chondrex 提供了一种简单的半定量测定试剂盒来测定培养细胞层和组织切片中胶原蛋白和非胶原蛋白的量（1-2）。因为该测定不需要胶原蛋白增溶，可用于测量各种组织中的总胶原蛋白含量（3-7）。由于天狼星红和快绿分别在540 nm和605 nm处有吸收，因此提取的染料的OD值可用于计算样品的胶原蛋白和非胶原蛋白含量。用于组织切片为10-20的一般组织学研究μm厚，胶原蛋白和非胶原蛋白的检测灵敏度分别大于3μg/切片和50μg/切片。这个试剂盒中的试剂足以对30-50个样本进行染色。
艾美捷天狼猩红胶原蛋白染色试剂盒：
货号：9046
描述：总胶原蛋白定量染色试剂盒
格式： 玻璃载玻片和细胞培养板
检测类型： 染料染色
检测时间： 根据样本类型不同而有所变化
标准范围： 胶原蛋白：每个切片3微克
非胶原蛋白质：每个切片50微克
样本数量： 每个试剂盒可处理30-50个样本
样本类型： 培养细胞和组织切片
推荐样本稀释倍数： 不适用
显色剂： 不适用（在540和605纳米处读取）
存储： 室温下可保存12个月
天狼猩红胶原蛋白染色试剂盒试剂盒内容：
项目 数量 金额 存储条件
染料溶液（90461） 1瓶 10毫升 室温
染料提取缓冲液（90462） 2瓶 30毫升 室温
计算结果：
要计算胶原蛋白的量，需要通过减去Fast Green在540 nm的贡献来校正OD 540值，Fast Green在OD 605值中占29.1%。在OD 540和605下，胶原蛋白的颜色等效（OD值/μg蛋白）为0.0378，非胶原蛋白的为0.00204。
胶原蛋白（μg/节）=【OD 540 value – (OD 605 value x 0.291)】/0.0378
非胶原蛋白（μg/节）=OD 605 value/0.00204
注意事项1：较厚的切片在洗涤步骤中容易从载玻片上脱落，请仔细洗涤载玻片。此外，由于检测灵敏度与载玻片上组织的表面积有关，切割较薄的切片不会显著提高检测灵敏度。
注意事项2：非胶原蛋白值可用于标准化样本结果，因为蛋白质水平与样本的表面积或细胞密度相关。
天狼猩红胶原蛋白染色试剂盒文献参考：
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