Sirius红是一种d特的染料，能特异性结合到纤维状胶原蛋白（I型至V型）的Gly-X-Y 螺旋结构上，并且不会区分胶原蛋白的种类和类型。Chondrex, Inc.提供Sirius红总胶原蛋白检测试剂盒，用于检测各种含胶原蛋白样本中的总胶原蛋白含量，如组织标本、细胞培养基和培养细胞。总检测时间不到30分钟，可以对40个样本进行重复测量。由于细胞培养基中胶原蛋白含量较低，可能需要额外的浓缩步骤。为了测定来自不同物种或不同类型样本的胶原蛋白水平，Chondrex, Inc.推荐使用我们的I型胶原蛋白检测ELISA试剂盒和II型胶原蛋白检测ELISA试剂盒。为方便起见，Collagen Detection ELISA试剂盒和Sirius红总胶原蛋白检测试剂盒可以使用相同的样本制备。
艾美捷天狼星红总胶原检测试剂盒：
货号：9062
描述：用于定量样本中总胶原蛋白含量的检测试剂盒
格式：带可拆卸条的96孔ELISA板
检测类型：比色法检测
检测时间：30分钟
标准范围：500 µg/ml至8 µg/ml
样本数量：每板可处理最多40个（重复）样本
样本类型：组织匀浆、细胞培养基和培养细胞
推荐样本稀释：根据样本类型而异
色素：不适用（在510-550 nm下读取）
储存条件：-20°C保存12个月
天狼猩红胶原蛋白染色试剂盒试剂盒内容：
项目 数量 金额 存储条件
标准 - 牛源I型胶原蛋白（90621） 1小瓶 0.5毫克/毫升，1毫升 -20°C
Sirius Red溶液（90622） 1瓶 50毫升 -20°C
洗涤溶液（90623） 1瓶 50毫升 -20°C/*
提取溶液（90624） 1瓶 30毫升 -20°C/*
0.5M醋酸（10倍醋酸）（90625） 1瓶 20毫升 -20°C/*
96孔板（9026） 1个 8孔条 x 12 -20°C/*
*洗涤液、提取液、0.5M醋酸和板也可以在室温下储存。不包括用于细胞培养基样品的浓缩溶液（目录号90626）。
培养基：
含有较高浓度血清的样本可能会导致高背景值。因此，Chondrex公司建议将细胞培养基中的血清补充浓度降低至5%，使用PBS稀释。
样本浓缩：
培养基中胶原蛋白的浓度通常较低，因此在该试剂盒的标准范围内检测培养基样本中的胶原蛋白是困难的。Chondrex公司推荐使用我们的浓缩溶液（产品编号90626）进行样本浓缩。此外，应使用培养基作为阴性对照，因为这种浓缩方法可能会导致背景水平升高。
1. 取1毫升培养基。
2. 添加250微升浓缩溶液。
3. 震荡混匀，并在4°C下孵育16-24小时。
4. 以10,000转/分钟的速度离心3分钟。
5. 丢弃上清液。
6. 添加100微升0.05M醋酸溶液以溶解沉淀。将此溶液作为样本使用。
7. 计算的胶原蛋白浓度应乘以0.1的稀释因子。
化验大纲：
天狼星红总胶原检测试剂盒文献参考：
Chothani S et al., Widespread Translational Control of Fibrosis in the Human Heart by RNA-Binding Proteins. Circulation 140(11):937-951, (2019). PMID: 31284728
Widjaja AA et al., IL-11 neutralising therapies target hepatic stellate cell-induced liver inflammation and fibrosis in NASH. Gastroenterology 157 (3), 777–792.e714, (2019). PMID: 31078624
Schafer S et al., IL-11 is a crucial determinant of cardiovascular fibrosis. Nature 552, 110-115, (2017). PMID: 29160304
Schanaider A et al., Exogenous pulmonary surfactant prevents the development of intra-abdominal adhesions in rats. J Cell Mol Med 20, 632-43 (2016).
