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2024/10/19 23:04:56在生物学和医学研究中,胎牛血清是一种极为重要的培养基成分,广泛应用于细胞培养实验。然而,胎牛血清的储存和使用条件对其质量有着至关重要的影响。本文将探讨为什么解冻后的胎牛血清不宜在2-8℃存放过久,并介绍正确的储存和使用方法。
胎牛血清的储存条件
未拆封的胎牛血清应储存在-10℃至-20℃的温度下,这是为了长期保持其稳定性和质量。在这一温度范围内,血清中的各种蛋白和脂蛋白能够保持其天然状态,避免发生变性或沉淀。如果储存温度过高,血清中的蛋白质容易变性,而温度过低(如-80℃)则可能导致瓶子破裂,从而污染血清。
解冻过程中的注意事项
解冻胎牛血清时,应该遵循逐步解冻的原则。首先,将血清从冷冻箱中取出,置于2-8℃冰箱中融解,然后在室温下使其融化。在整个解冻过程中,必须规则地摇晃均匀,以确保血清的温度和成分均匀一致,减少沉淀的发生。
2-8℃存放过久的后果
虽然2-8℃是许多生物样本的常规储存温度,但对于解冻后的胎牛血清来说,这一温度并不适宜长期存放。实验表明,长时间在2-8℃储存的血清,其中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能会聚集而形成沉淀或可见的混浊。这些沉淀物不仅影响血清的透明度,还可能影响其在细胞培养中的效果。
此外,血清中的一些营养成分在解冻后就开始降解,如果长时间在2-8℃存放,这些营养成分的降解速度会加快,进一步影响血清的质量。因此,解冻后的胎牛血清应该尽快使用,避免在2-8℃存放过久。
正确的使用建议
为了确保胎牛血清的质量和效果,建议按照以下步骤使用:
解冻:按照逐步解冻法,将血清从-20℃或更低温度取出,先在2-8℃冰箱中融解,然后在室温下使其融化,并规则地摇晃均匀。
分装:如果一次无法用完一瓶血清,建议无菌分装至恰当大小的灭菌容器内,再放回-20℃冷冻保存。这样可以有效避免反复冻融对血清质量的影响。
使用:配制完培养基后,应尽快使用。已经配制了血清及抗生素的新鲜培养液,最好在两周内用完,以避免营养成分的降解。
解冻后的胎牛血清不宜在2-8℃存放过久,因为长时间在这一温度下储存会导致血清中的蛋白和脂蛋白聚集形成沉淀,同时加速营养成分的降解。为了确保血清的质量和效果,应该遵循正确的储存和使用方法,包括逐步解冻、无菌分装和尽快使用。只有这样,才能保障细胞培养实验的准确性和稳定性。