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源性成分试剂盒作用与使用条件如下

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2024/10/22 14:54:39
  源性成分试剂盒是一种用于检测食品、化妆品和饲料等样品中动物源性成分的实验工具。其作用与使用条件如下:
  一、源性成分试剂盒作用:
  快速准确检测:利用实时荧光PCR技术,能够快速准确地检测出样品中的牛源性成分。通过设计特异性引物和探针,针对动物种间基因多态性的差异进行鉴定,确保检测结果的准确性。例如,基于线粒体DNA cytochrome c oxidase subunit I(COX I)基因上的差异,可以区分不同种类的动物源性成分。
  监控反应过程:试剂盒中含有内参照(Internal Control),可以监控PCR反应是否正常进行,防止假阴性结果的出现。通过对内参照基因的检测,能够判断反应体系是否受到抑制或存在其他问题,从而提高检测结果的可靠性。
  适用范围广泛:不仅适用于黄牛(Bos taurus)的检测,部分试剂盒还可同时检测水牛(Bubalus bubalis)、牦牛(Bos grunniens)等其他牛类品种的成分。不过,由于检测品种不同,扩增序列可能存在变异,某些品种的牛可能无法被检出。该试剂盒可应用于食品、化妆品和饲料等多种样品中牛源性成分的鉴别。
  二、源性成分试剂盒使用条件:
  分区操作:为了防止污染,实验要分区操作。通常分为三个区域:①反应液配制区;②样品制备区;③样品添加区及反应检测区。这三个区之间必须进行物理性隔离,避免人为因素造成污染。
  试剂处理:2X Premix for Bovine制品融解后,需要上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经轻微离心后使用。Probe Mix for Bovine应避光保存。
  配制要求:配制Real Time PCR反应液时应避免强光照射。反应液的配制、分装请一定使用新的(无污染的)枪头、Microtube等,尽量避免污染。
  温度控制:一般需要在特定的温度条件下进行反应,如反转录步骤通常在42℃下进行,而PCR扩增则需要在95℃预变性后,进行若干个循环的变性、退火和延伸过程,每个循环的温度和时间根据具体的试剂盒和实验要求而定。
 

 

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