在继续探讨HGC-27细胞，即人未分化胃癌细胞的操作步骤时，我们需细致入微地确保每一步的精确性和无菌操作的重要性。
首先，进行细胞复苏时，需快速将冻存的HGC-27细胞从液氮中取出，并迅速置于37℃水浴中轻轻摇晃，确保细胞在1分钟内融化。随后，将细胞悬液转移至预装有培养基的离心管中，轻柔混匀后离心，去除上清液，再加入新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，置于37℃、5% CO2的恒温培养箱中培养。
细胞传代时，待细胞长至80%-90%融合度，弃去旧培养基，用PBS清洗两次后，加入适量胰酶消化细胞，待细胞变圆、间隙增大时，加入培养基终止消化，吹打制成细胞悬液，按一定比例分至新的培养瓶中继续培养。
此外，细胞冻存也至关重要。选择对数生长期的细胞，按上述方法消化、离心后，用细胞冻存液重悬细胞，调整细胞密度至适宜范围，分装至冻存管中，标记好细胞名称、冻存日期等信息后，按梯度降温法逐步冷冻，最终置于液氮中长期保存。
在整个操作过程中，严格的无菌操作、精准的细胞计数以及适时的培养基更换，都是确保HGC-27细胞健康生长和实验成功的关键。
