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2024/11/4 11:42:23

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‌细胞培养基是一种用于细胞培养的营养基质,它模拟了细胞在体内生长的环境,提供必要的营养和促进细胞的生长和增殖。‌

细胞培养基的主要成分包括水、氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其他辅助营养物质。这些成分共同作用,满足细胞的合成、代谢等生化反应所需的物质和能量。

细胞培养基的类型



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根据其成分、用途和性质,培养基可以分为多种类型。
合成培养基:合成培养基的成分明确,营养全面,适用于各种细胞类型的培养。常见的合成培养基有MEM、DMEM、RPMI等。
天然培养基:天然培养基以动物血清或血浆为基质,添加一定量的营养成分,适用于某些特定细胞类型的培养。如添加了动物血清的DMEM称为血清培养基。
无血清培养基:指不含任何动物来源的血清成分,以减少潜在的传染病风险和提高实验的可重复性。无血清培养基通常需要添加特定的化学添加剂来模拟血清中的作用。目前已有多种无血清培养基上市,如杂交瘤细胞无血清培养基、CHO细胞无血清培养基、Vero细胞无血清培养基等。无血清培养基通常添加生长附加成分,如激素与生长因子、低分子营养成分和转铁蛋白等促细胞生长的附加成分,一般包括胰岛素、孕酮、腐胺、转铁蛋白等。
悬浮培养基:悬浮培养基适用于悬浮生长类型的细胞,如骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞等。悬浮培养基中通常含有较少的营养成分,以维持细胞在悬浮状态下的生长。
实体培养基:实体培养基适用于贴壁生长类型的细胞,如细胞系、原代细胞等。实体培养基中通常含有较多的营养成分,以满足细胞在实体状态下的生长需求。
诱导分化培养基:诱导分化培养基用于促使细胞向特定方向分化的培养基。通过添加分化诱导剂或改变营养成分的组成,可以实现对细胞分化的调控。

低氧培养基:低氧培养基用于模拟低氧环境,适用于某些特定细胞类型的培养,如血管内皮细胞、肌肉细胞等。低氧培养基中通常含有较低浓度的氧气,以促进细胞在低氧条件下的生长和功能表达。



常用培养基介绍

培养基有很多种,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是应用较为广泛的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。下面,分别介绍一下它们各自的成分和特点。

MEM培养基

MEM培养基(Minimum Essential Medium),必需培养基,也称最小基本培养基、Eagle培养基,是动物细胞培养中常用的基础培养基之一。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、8种维生素及基础无机盐,营养成分简单,主要用于贴壁细胞的培养,经过配方修订后也可用于其他类型细胞培养。

MEM含NEAA(非必需氨基酸)的培养基,是在MEM基础上添加了7种NEAA,包括L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸及甘氨酸,能降低细胞培养时细胞自身合成非必需氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢

DMEM培养基

DMEM培养基是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞。可用于多种哺乳动物原代细胞的培养,也可以用于一些细胞系的培养。低糖培养基适合代谢作用慢、依赖性贴壁细胞的培养。

RPMI-1640培养基

RPMI-1640最初是为淋巴细胞培养专门设计的,目前已广泛应用于各种正常细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养,是使用最为广泛的培养基之一。像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

不含葡萄糖的RPMI-1640培养基可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。

DMEM/F-12培养基

DMEM/F-12培养基是将DMEM与Ham's F-12培养基以1:1比例混合改良而来的。改良得到的DMEM/F-12培养基,营养成分更为丰富,含有更多种微量元素,广泛应用于多种哺乳类细胞的培养,也适用于于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养已在DMEM/F-12之中成功培养的细胞包括MDCK、胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及小鼠成纤维细胞。

McCoy’s 5A培养基

McCoy's 5A 培养基主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。

L-15培养基

L-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统,同时,用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成,有助于维持培养液PH的稳定,适用于猴肾细胞和HEP-2 的培养、原代(如胚胎和成人组织)细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等。

M199培养基

M199细胞培养基是一款经典的细胞培养基,最早由Morgan等人于1950年设计开发,主要用于研究鸡胚成纤维细胞的营养需求。经过不断的优化与应用扩展,M199目前已广泛应用于多种细胞的培养,包括哺乳类和非哺乳类动物细胞。尤其是在非转化细胞培养、疫苗生产以及病毒学研究等领域,M199表现出色,成为科研和工业生产中的重要工具。
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